不同培養(yǎng)條件對產毒銅綠微囊藻和不產毒銅綠微囊藻生長競爭的影響.pdf

1、銅綠微囊藻是水華時的優(yōu)勢藻種,銅綠微囊藻可分為產毒銅綠微囊藻和不產毒銅綠微囊藻,不同的環(huán)境條件可以影響這兩種藻的競爭關系。本文對比并選擇了一種最佳的銅綠微囊藻DNA提取方法并據(jù)此建立一套測定水中產毒和不產毒銅綠微囊藻濃度的實時熒光定量PCR方法,應用該方法檢測混合培養(yǎng)液中兩張藻量,通過PB設計和CCD設計考察了光照、溫度、pH、硝態(tài)氮離子濃度、P離子濃度這五個因素對產毒/不產毒銅綠微囊藻生長競爭的綜合影響。全文研究內容和實驗結果如下:<

2、br>　　 (1)分別對比了SDS裂解法、Dneasy Blood&Tissue Kit試劑盒、CTAB提取法提取銅綠微囊藻DNA的效果,結果表明采用Dneasy Blood& Tissue Kit試劑盒提取DNA具有很好的重復性,提取效率穩(wěn)定;SDS裂解法也能有效提取銅綠微囊藻的DNA,但是重復性略差;CTAB法在提取樣品DNA時發(fā)生了降解。
　　 (2)分別用SDS裂解法和Dneasy Blood& Tissue Kit試

3、劑盒提取不產毒銅綠微囊藻標準品的DNA并建立標準曲線。結果表明采用Dneasy Blood& TissueKit試劑盒提取的標準品DNA具有很好的重復性,采用該方法提取的標準品DNA經PCR擴增后可以建立相關性很好的標準曲線用于產毒和不產毒銅綠微囊藻濃度的定量檢測。
　　 (3)應用實時熒光定量PCR檢測混合培養(yǎng)液中的產毒銅綠微囊藻和不產毒銅綠微囊藻的細胞濃度,通過PB設計在光照、溫度、pH、硝態(tài)氮離子濃度、P離子濃度這五個因素