實(shí)驗(yàn)室常用儀器的使用與簡(jiǎn)單養(yǎng)護(hù)

1、,,常用儀器的使用與簡(jiǎn)單養(yǎng)護(hù),常用儀器,,,4,,,移液器,1,,,2,,,3,,,5,電子天平,離心機(jī),高壓滅菌鍋,干燥箱,移液器的類型,根據(jù)排液方式,一類是氣墊式（內(nèi)置）活塞移液器 （諾禾實(shí)驗(yàn)室常用）一類是外置式活塞移液器,根據(jù)通道數(shù),單道多道（8道和12道）還可以分為：手動(dòng)自動(dòng)（電動(dòng)）,諾禾常用的移液器品牌有Eppendorf （德國(guó)）、RAININ（美國(guó)）、GILSON（法國(guó)）、Thermo（美國(guó)）,諾禾實(shí)驗(yàn)室常用的移

2、液器,Eppendorf Research Plus,外部結(jié)構(gòu),1 控制鈕—第一檔：液體體積計(jì)量； 第二擋：排出吸嘴內(nèi)剩余液體2 調(diào)節(jié)鈕—設(shè)定移液量3 彈射鍵—彈除吸頭4 調(diào)整開(kāi)孔—系統(tǒng)校正調(diào)整5 彈射套筒6 多道移液器下半段7 蓋板8 下半段分離鍵9 外罩,內(nèi)部結(jié)構(gòu),活塞不與樣品直接接觸,活塞桿,工作原理,空氣置換原理：通過(guò)活塞、彈簧的伸縮運(yùn)動(dòng)，調(diào)節(jié)空氣負(fù)壓和正壓來(lái)實(shí)現(xiàn)吸液和排液。,排出部分空氣

3、,空氣墊,壓力減小,按鍵下壓,按鍵釋放,活塞向下移動(dòng),活塞向上移動(dòng),量程內(nèi)原則 —— 即所需移取的體積必須在移液器的量程內(nèi)半量程原則 —— 即使用同一移液器，在半量程以上相對(duì)于半量程以下要精確就小不就大原則 ——即移取同一體積的液體，應(yīng)選用最大量程較小的移液器,選擇量程,量程：0.1-2.5ul、0.5-10ul、2-20ul、10-100ul、20-200ul、100-1000ul,容量設(shè)定,

4、由大到小原則： 當(dāng)由小容量調(diào)到大容量時(shí)，應(yīng)調(diào)整到大于設(shè)定容量值的 1/4 圈，再回調(diào)至設(shè)定值，這樣可排除機(jī)械間隙。（不要超過(guò)最大量程，否則可能會(huì)卡住內(nèi)部機(jī)械裝置而損壞移液器）,順時(shí)針調(diào)小 逆時(shí)針調(diào)大,不同量程移液器技術(shù)參數(shù)：,,,安裝吸頭,吸頭選擇：與移液器相匹配！,單道移液器——旋轉(zhuǎn)安裝法：將移液器垂直插入吸頭，在稍許用力下壓的同時(shí)，左右輕輕旋轉(zhuǎn)，上緊吸頭。,切勿用“反復(fù)撞擊”吸頭的方法來(lái)進(jìn)行安裝；否則長(zhǎng)

5、期以往會(huì)導(dǎo)致零部件松散，甚至使調(diào)節(jié)刻度的旋鈕卡住。,多道移液器———將移液器的第一道對(duì)準(zhǔn)第一個(gè)吸頭，傾斜插入，其它吸頭前后搖動(dòng)上緊。,正向吸液是常用的吸液方式最適用于水性溶液，如：水緩沖液稀鹽溶液稀酸堿溶液,吸液,按下控制鈕至第一檔； 將吸頭垂直進(jìn)入液面下1-5mm（視吸頭容量而定）： 0.1-10 ul 容量 1 - 2 mm； 2-200 ul 容量

6、 2 - 3 mm； 1 – 5 ml 容量 3 - 5 mm； 使控制鈕緩慢滑回原位； 吸頭移出液面前略等待1秒，至液面穩(wěn)定；緩慢提出移液器，確保吸頭外壁無(wú)液體。,切勿突然松開(kāi)控制鈕，以防溶液吸入過(guò)快沖入移液器內(nèi)，污染活塞，造成漏氣。,排液,將吸頭以一定角度抵住容器內(nèi)壁；緩慢將控制鈕按至第一檔并等待約1－3秒； 將控制鈕按至第二檔同時(shí)，吸頭嘴慢慢離開(kāi)液面，使槍頭完全排空；按住控制

7、鈕，沿容器內(nèi)壁拖出吸頭，放開(kāi)控制鈕；按壓彈射鍵棄掉吸頭。,（特殊情況需抵住容器底部或液面）,反向吸液適用于：易揮發(fā)液體粘稠液體小體積移液,反向吸液一般與預(yù)潤(rùn)濕吸液方式結(jié)合使用,相同液體反復(fù)吸、排2-3次，吸頭內(nèi)壁會(huì)形成一層同質(zhì)液膜，可以補(bǔ)償吸頭的表面吸附，再進(jìn)行移液比較準(zhǔn)確。通過(guò)預(yù)潤(rùn)濕吸液的方式來(lái)可達(dá)到精確移液。,吸液、排液注意事項(xiàng)：,六個(gè)度：角度——垂直吸液，貼壁排液深度——吸頭浸入液面速度——慢吸慢放（液體越稠要越

8、慢）濕度——將吸頭預(yù)潤(rùn)濕（反復(fù)吸排）2～3次適度——吸排液時(shí)的停頓時(shí)間；配合度——排液的速度與吸嘴離開(kāi)液面（或內(nèi)壁）的速度,使用完畢,移液器使用完畢后，按彈射鍵卸去吸頭，把刻度調(diào)至最大量程，掛在移液器架上。,切勿將吸頭內(nèi)含有液體的移液器平放在桌上，以免液體進(jìn)入活塞污染移液器。,移液器中的O型環(huán)（密封圈）、彈簧和活塞是我們重點(diǎn)養(yǎng)護(hù)的對(duì)象。,一. 常見(jiàn)問(wèn)題及處理方法,回彈不暢,1、檢測(cè)：下壓控制鈕后，控制鈕卡住或回彈不暢，可如下檢

9、查：,2、可能原因：彈簧受損、活塞污染 處理方法：反饋實(shí)驗(yàn)室管理，請(qǐng)專業(yè)工程師處理。,漏氣（漏液）,1. 檢測(cè)： 大量程，吸液后垂直靜置 15 s，觀察是否有液滴； 小量程則會(huì)有打不盡的現(xiàn)象。,移液不準(zhǔn),移取體積跟實(shí)際體積不相符處理方法：反饋實(shí)驗(yàn)室管理，請(qǐng)專業(yè)工程師校正。,2. 可能的原因： - 吸頭是否匹配？ 處理方法：更換匹配的吸頭 - 裝配吸頭時(shí)有無(wú)上

10、緊？ 處理方法：上緊吸頭 - 移液器內(nèi)部氣密性不好？ 處理方法：反饋實(shí)驗(yàn)室管理,實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，需用75%酒精噴灑移液器套筒部位，并用無(wú)屑紙由上至下擦拭消毒，切勿上下反復(fù)擦拭，以防污染。定期清潔移液器，可用75%酒精棉擦拭手柄、彈射器及套筒外部，發(fā)現(xiàn)問(wèn)題及時(shí)反饋實(shí)驗(yàn)室管理。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，將移液器刻度調(diào)至最大量程，使彈簧恢復(fù)原形，延長(zhǎng)移液器使用壽命。移液器掛置移液器架上。,二. 日常維護(hù)保養(yǎng),外置式活塞

11、移液器,其他類型移液器,內(nèi)部結(jié)構(gòu),活塞設(shè)計(jì)在吸頭內(nèi)部，直接與液體接觸。由于使用全封閉活塞系統(tǒng)從而避免了氣溶膠污染，所以在處理易揮發(fā)、放射性、腐蝕性或有毒物質(zhì)時(shí)更加安全。如Eppendorf  Multipette分液器，配合Combitips分液頭使用。,彈簧,電動(dòng)移液器,也是利用空氣置換原理，由活塞在活塞套內(nèi)作定程運(yùn)動(dòng)產(chǎn)生負(fù)壓，壓入定量的液體。有一內(nèi)置馬達(dá)系統(tǒng)，控制每一移液動(dòng)作。,一般電動(dòng)移液器常用模式有：p模式

12、（常規(guī)移液模式）、d模式（重復(fù)分液模式）、dd模式（稀釋模式）三種。,Q & A ?,電子天平的類型,根據(jù)傳感器方式,電磁平衡式傳感器（實(shí)驗(yàn)室常用）電容式傳感器應(yīng)變式傳感器,根據(jù)精度(檢定標(biāo)尺分度值e)分類,超微量天平微量天平準(zhǔn)微量天平分析天平精密電子天平,還可以分為： 千萬(wàn)分之一天平、百萬(wàn)分之一天平、十萬(wàn)分之一天平、萬(wàn)分之一天平、千分之一天平等,傳感器位置檢測(cè)器PID調(diào)節(jié)器功率放大器低通濾波器模數(shù)轉(zhuǎn)換器

13、微計(jì)算機(jī),防風(fēng)罩秤盤顯示器機(jī)殼底腳,通過(guò)調(diào)節(jié)底腳螺絲，使水平儀內(nèi)氣泡位于圓環(huán)中心。,調(diào)水平,放入稱量器皿，關(guān)閉側(cè)門，去皮清零,取出物品，關(guān)閉電源，清潔并記錄,打開(kāi)開(kāi)關(guān)，自檢,在器皿上放稱量物品，穩(wěn)定后讀數(shù),,,,,被稱物品盡可能放在中央并要求輕放,,,注意事項(xiàng),通過(guò)調(diào)節(jié)底腳螺絲，使水平儀內(nèi)氣泡位于圓環(huán)中心。放入稱量容器后去皮，放入稱量物后應(yīng)關(guān)閉箱門以免空氣流動(dòng)影響讀數(shù)。稱量易揮發(fā)和具有腐蝕性的物品時(shí)，要盛放在密閉的容器內(nèi)以

14、免腐蝕和損壞電子天平。操作天平不可過(guò)載使用，以免損壞天平（量程220g） 。被稱物品盡可能放在中央并要求輕放。保持天平稱量室的清潔，稱量后應(yīng)及時(shí)小心清潔。不得隨意挪動(dòng)，如需挪動(dòng)必須再次調(diào)水平。若天平在初次接通電源或長(zhǎng)時(shí)間斷電之后，至少要預(yù)熱30min。,常見(jiàn)問(wèn)題,顯示器完全無(wú)顯示或顯示不穩(wěn)定（1） 物品揮發(fā)或者吸濕→放在密閉的容器內(nèi)（2） 天平放置不穩(wěn)，防風(fēng)窗未關(guān)閉→調(diào)整位置，關(guān)閉防風(fēng)窗 （3） 環(huán)境溫度變化大→反饋實(shí)驗(yàn)室

15、管理（4） 電源和交流適配器問(wèn)題→反饋實(shí)驗(yàn)室管理,微孔板迷你離心機(jī),手掌型離心機(jī),桌面離心機(jī),高速冷凍離心機(jī),板式離心機(jī),機(jī)架、轉(zhuǎn)頭驅(qū)動(dòng)系統(tǒng)控制系統(tǒng)安全保護(hù)系統(tǒng)等,離心機(jī)的原理,離心就是利用離心機(jī)轉(zhuǎn)子高速旋轉(zhuǎn)產(chǎn)生的強(qiáng)大的離心力，加快液體中顆粒的沉降速度，把樣品中不同沉降系數(shù)和浮力密度的物質(zhì)分離開(kāi)。,接通電源，打開(kāi)離心機(jī)蓋（冷凍離心機(jī)除外）,配平離心管（數(shù)量、體積），旋緊蓋子,取出物品，關(guān)閉電源，清潔并記錄,選擇合適的轉(zhuǎn)頭和離心管

16、,參數(shù)設(shè)置，離心,,,,,待離心機(jī)完全停止轉(zhuǎn)動(dòng)，才能打開(kāi)機(jī)蓋！,待轉(zhuǎn)速上升到設(shè)定值后，才能離開(kāi)！,注意事項(xiàng),離心管內(nèi)裝載的溶液量必須合適，離心管可裝至2/3處，管蓋必須蓋嚴(yán)絕不允許漏液。離心管必須嚴(yán)格平衡（數(shù)量及體積）。離心時(shí)不準(zhǔn)打開(kāi)機(jī)蓋，不準(zhǔn)扒扶在離心機(jī)上，如有異常聲音和振動(dòng)時(shí)立即停機(jī)檢查。離心機(jī)需定期清潔，用擦孔棒將管孔仔細(xì)擦凈。如有溶液溢出必須清洗干凈，擦凈轉(zhuǎn)頭室內(nèi)凝水，開(kāi)門涼干轉(zhuǎn)頭室。轉(zhuǎn)速設(shè)定不得超過(guò)最高轉(zhuǎn)速。,常見(jiàn)問(wèn)題

17、,離心機(jī)不轉(zhuǎn)或轉(zhuǎn)速達(dá)不到設(shè)定值 電源電路部分故障；電動(dòng)機(jī)自身故障；轉(zhuǎn)速控制部分故障?？刂泼姘骞收希粋鞲衅鞴收?→反饋實(shí)驗(yàn)室管理,,,,,工作原理,基于水在煮沸時(shí)所形成的蒸汽不能擴(kuò)散到外面去，而聚集在密閉的容器中，隨著水的煮沸，蒸汽壓升高，溫度也相應(yīng)增加，熱穿透能力增強(qiáng)，使蛋白質(zhì)變性或者凝固。,逆時(shí)針轉(zhuǎn)動(dòng)手輪數(shù)圈，直至轉(zhuǎn)到頂，使蓋充分提起，推開(kāi)橫梁，移開(kāi)鍋蓋,開(kāi)蓋,放需滅菌的物品，蓋上鍋蓋,取出物品，關(guān)閉電源，清潔并記錄,通電，

18、加水,設(shè)定滅菌溫度和時(shí)間,,,,,控制面板上低水位或缺水位指示燈亮，需向鍋內(nèi)補(bǔ)充純水,物品之間保留一定縫隙，順時(shí)針轉(zhuǎn)動(dòng)手輪數(shù)圈，使鍋蓋向下壓緊鍋體，液體滅菌前將瓶蓋旋松,將溫度設(shè)定在121℃，時(shí)間設(shè)定在20~30min,待壓力下降至0再打開(kāi)鍋蓋！,滅菌前需確保滅菌鍋內(nèi)水位正常，不足需加純水補(bǔ)充。堆放滅菌物品時(shí)，嚴(yán)禁堵塞安全閥和放氣閥，否則容易容器爆裂。滅菌液體時(shí)，盛液不超過(guò)容器的3/4，結(jié)束后不可放氣減壓。液體滅菌前蓋子旋松，滅

19、菌結(jié)束后及時(shí)將蓋子旋緊。壓力表使用日久后，壓力指示不正確或不恢復(fù)零位，應(yīng)及時(shí)反饋實(shí)驗(yàn)室管理。需定期檢查安全閥的可靠性，如有異常及時(shí)反饋實(shí)驗(yàn)室管理。,干燥箱的原理,通過(guò)電能使加熱管加熱，并利用風(fēng)機(jī)循環(huán)熱空氣，確保室內(nèi)溫度均勻性，熱空氣對(duì)潮濕物品加熱，水分也會(huì)因加熱變成水蒸氣混入熱風(fēng)中，達(dá)到對(duì)箱內(nèi)物品進(jìn)行干燥。,把物品放入干燥箱內(nèi)，關(guān)好箱門,設(shè)置工作溫度,取出物品，關(guān)閉電源，清潔并記錄,打開(kāi)電源,運(yùn)行,,,,,根據(jù)物品要求，設(shè)置工作溫度

20、,把電源開(kāi)關(guān)撥至“1”處，此時(shí)電源開(kāi)關(guān)亮，顯示屏有數(shù)字顯示，再將電機(jī)控制開(kāi)關(guān)按至“1”處。,75%酒精擦拭干燥箱內(nèi)部，作好記錄,干燥箱無(wú)防爆裝置，不得放入易燃易爆易揮發(fā)物品。箱內(nèi)物品放置切勿過(guò)擠，必須留有空間，以利空氣循環(huán)。打開(kāi)箱門取物時(shí)請(qǐng)千萬(wàn)注意，以免燙傷。每次使用結(jié)束后，關(guān)閉電源。定期清潔，用75%酒精擦拭烘箱內(nèi)部。若存放環(huán)境濕度大，應(yīng)定期（1個(gè)月左右）通電升溫進(jìn)行驅(qū)潮處理。出現(xiàn)任何異常，需及時(shí)反饋實(shí)驗(yàn)室管理。,Q &a