化學(xué)發(fā)光技術(shù)綜述

1、化學(xué)發(fā)光技術(shù)綜述化學(xué)發(fā)光技術(shù)綜述化學(xué)發(fā)光免疫測定（CLIA）是將抗原與抗體特異性反應(yīng)與敏感性的化學(xué)發(fā)光反應(yīng)相結(jié)合而建立的一種免疫檢測技術(shù)。（一）原理化學(xué)發(fā)光免疫測定（CLIA）屬于標(biāo)記抗體技術(shù)的一種，它以化學(xué)發(fā)光劑、催化發(fā)光酶或產(chǎn)物間接參與發(fā)光反應(yīng)的物質(zhì)等標(biāo)記抗體或抗原，當(dāng)標(biāo)記抗體或標(biāo)記抗原與相應(yīng)抗原或抗體結(jié)合后，發(fā)光底物受發(fā)光劑、催化酶或參與產(chǎn)物作用，發(fā)生氧化還原反應(yīng)，反應(yīng)中釋放可見光或者該反應(yīng)激發(fā)熒光物質(zhì)發(fā)光，最后用發(fā)光光度計(jì)進(jìn)行檢

2、測。（二）特點(diǎn)特異性高、敏感性高、分離簡便、快速、試劑無毒、安全穩(wěn)定、可自動化。（三）分類1、從反應(yīng)原理上，化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)主要分為直接化學(xué)發(fā)光和酶促反應(yīng)化學(xué)發(fā)光。1.1直接化學(xué)發(fā)光化學(xué)發(fā)光劑在發(fā)光免疫分析過程中不需酶的催化作用，直接參與發(fā)光反應(yīng)，它們在化學(xué)結(jié)構(gòu)上有產(chǎn)生發(fā)光的特有基團(tuán)，可直接標(biāo)記抗原③光釋放快速集中、發(fā)光效率高、發(fā)光強(qiáng)度大；④易于與蛋白質(zhì)聯(lián)結(jié)且聯(lián)結(jié)后光子產(chǎn)率不減少；⑤標(biāo)記物穩(wěn)定（在28℃下可保存數(shù)月之久）。1.1.2.三

3、聯(lián)吡啶釕三聯(lián)吡啶釕[RU(bpy)3]2是電化學(xué)發(fā)光劑，它和電子供體三丙胺（TPA）在陽電極表面可同時(shí)失去一個(gè)電子而發(fā)生氧化反應(yīng)。1.2酶促反應(yīng)化學(xué)發(fā)光是利用標(biāo)記酶的催化作用，使發(fā)光劑（底物）發(fā)光，這一類需酶催化后發(fā)光的發(fā)光劑稱為酶促反應(yīng)發(fā)光劑。酶促化學(xué)發(fā)光靈敏度高，但速度慢，酶活性容易受外界影響，其代表性的發(fā)光物質(zhì)有魯米諾及其衍生物、AMPPD1.2.1.魯米諾及其衍生物（HRP)激活酶為辣根過氧化物酶（HRP)，魯米諾體系的發(fā)光基本