實(shí)驗(yàn)十四--血清膽固醇測(cè)定(膽固醇氧化酶法)

1、實(shí)驗(yàn)十四實(shí)驗(yàn)十四血清膽固醇測(cè)定血清膽固醇測(cè)定（膽固醇氧化酶法）（膽固醇氧化酶法）膽固醇的測(cè)定方法很多；通?？煞譃榛瘜W(xué)試劑比色法、酶法、氣相色譜法、高效液相色譜法、核素稀釋質(zhì)譜法五大類?；瘜W(xué)試劑比色法中有直接法和間接法；前者可用血清直接測(cè)定，后者是用溶劑或其它方法提取膽固醇后再作定量。酶法由于操作簡便、結(jié)果準(zhǔn)確，試劑無腐蝕性，而且因使用特異性酶，大大減少了血液中其它成分的干擾，目前已成為測(cè)定膽固醇的主要方法?！灸康哪康摹?了解膽固醇氧化酶

2、法測(cè)定血清膽固醇的原理，能進(jìn)行血清膽固醇測(cè)定的操作。2.掌握血清膽固醇測(cè)定的臨床意義?！驹碓怼垦逯锌偰懝檀迹═C）包括膽固醇酯(CE)和游離型膽固醇(FC)酯型占70%，游離型占30%。膽固醇酯酶（CEH）先將膽固醇酯水解為膽固醇和游離脂肪酸（FFA），膽固醇在膽固醇氧化酶（COD）的作用下氧化生成Δ4膽甾烯酮和過氧化氫。后者經(jīng)過氧化物酶（POD）催化氫與4氨基安替比林（4AAP）和酚反應(yīng)，生成紅色的醌亞胺，其顏色深淺與膽固醇的含

3、量呈正比，在500nm波長處測(cè)定吸光度，與標(biāo)準(zhǔn)管比較可計(jì)算出血清膽固醇的含量。反應(yīng)式如下：￡CEH￡O2?4?￡H2O2COD2H2O2￡4￡P(guān)OD【器材器材】試管、吸管、試管架、微量加樣器、恒溫水浴箱、分光光度計(jì)?！驹噭┰噭棵阜y(cè)定膽固醇多采用市售試劑盒。1.酶應(yīng)用液膽固醇酶試劑的組成為：pH6.7磷酸鹽緩沖液50mmolL膽固醇酯酶≥200UL膽固醇氧化酶≥100UL過氧化物酶≥3000UL4氨基安替比林0.3mmolL征、膽管阻