2023年全國碩士研究生考試考研英語(yǔ)一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁(yè)
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1、雙水相萃取技術(shù)是一種利用物質(zhì)在兩相間選擇性分配的分離純化技術(shù),其原理與水一有機相萃取原理相似。雙水相體系是指高聚物之間或高聚物與無(wú)機鹽之間以適當的濃度溶解后形成互不相溶的兩相或多相體系。該體系含水量高,蛋白在其中不易變形;表面張力低,有助于強化相間的質(zhì)量傳遞;分相時(shí)間短,易于放大和連續操作,萃取環(huán)境溫和,生物相容性好等,考慮到雙水相萃取技術(shù)的以上諸多優(yōu)勢,因此本文就采用了雙水相萃取技術(shù)分離純化尿酸酶和磷酸甘油氧化酶,建立了適當的雙水相體

2、系,并對影響萃取效果的各種因素進(jìn)行了研究。同時(shí)對萃取后,酶的進(jìn)一步分離純化和鑒定作了相關(guān)研究。主要研究結果如下: 1.選用PEG和硫酸銨作為雙水相體系的組成部分,分別用三種分子量的PEG(即PEG400,PEG600,PEG2Q00)與硫酸銨建立起三種雙水相體系。并確定了組成濃度的范圍。 2.利用三種雙水相體系萃取分離發(fā)酵后的菌體破碎液中的尿酸酶,確定了萃取尿酸酶的最佳PEG分子量為2000。研究了萃取體系中各種因素對尿

3、酸酶萃取的影響,確立了萃取尿酸的最佳條件。當PEG2000為25%,硫酸銨為9%,PH=7.5,NaC12%為,粗酶量為5%時(shí),萃取后的尿酸酶的純化倍數達到了10,回收率約為90%。根據SDS-PAGE檢測,得出萃取后的雜蛋白明顯少于萃取前。并采用DEAE陰離子交換層析對雙水相萃取后的尿酸酶進(jìn)一步純化,通過(guò)SDS-PAGE進(jìn)行鑒定,還原和非還原均得到一條帶。 3.利用雙水相體系萃取發(fā)酵中的磷酸甘油氧化酶,確定萃取GPO的最佳PE

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