紫蛇尾(Ophiopholis mirabilis)多糖的提取、純化及生物活性研究.pdf

1、本論文以黃渤海交界處長島海域的紫蛇尾作為實(shí)驗(yàn)材料,采用正交實(shí)驗(yàn)法優(yōu)化了紫蛇尾多糖的提取工藝,測定了紫蛇尾粗多糖的脫蛋白工藝,并對紫蛇尾多糖理化性質(zhì)進(jìn)行了測定,研究了紫蛇尾多糖的分離純化,以及紫蛇尾粗多糖的部分生物活性,包括:抑菌活性,抗氧化活性以及對心肌細(xì)胞的保護(hù)作用,為紫蛇尾資源的開發(fā)利用提供必要的理論依據(jù)。
　　采用L9(34)正交實(shí)驗(yàn)法,以多糖產(chǎn)率為指標(biāo),研究提取溫度、提取時(shí)間、料液比、提取次數(shù)4個(gè)因素對提取工藝的影響。以正

2、交實(shí)驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果為條件建立多元線性模型,結(jié)果表明:對紫蛇尾多糖得率影響最大的因素是溫度,其次是提取次數(shù)、提取時(shí)間和料水質(zhì)量比。本實(shí)驗(yàn)得出的最佳提取工藝條件為:料水質(zhì)量比1∶20,溫度70℃,提取時(shí)間4h,提取次數(shù)4次。結(jié)果可信,說明紫蛇尾多糖的產(chǎn)率和提取工藝相關(guān)因素有顯著的相關(guān)關(guān)系。
　　采用實(shí)驗(yàn)中常用的Sevag法,酶法,以及酶-Sevag法聯(lián)用三種方法,進(jìn)行脫蛋白比較。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,酶-Sevag法聯(lián)用是脫除紫蛇尾中粗多糖中蛋

3、白質(zhì)最為有效的方法。
　　采用傳統(tǒng)的水提和堿提法得到兩種紫蛇尾多糖粗品,測定這兩種紫蛇尾粗多糖的的部分常規(guī)理化性質(zhì),并對其進(jìn)行分離純化。
　　采用改進(jìn)的平板菌落計(jì)數(shù)法測定紫蛇尾粗多糖是否具有抑菌活性以及對不同醇沉濃度的粗多糖進(jìn)行了抑菌活性的比較,并采用濾紙片法對上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行了驗(yàn)證。采用改進(jìn)的瓊脂稀釋法測定了紫蛇尾粗多糖的最低抑菌濃度。研究結(jié)果表明所提取的6種紫蛇尾粗多糖均具有抑菌活性。
　　采用化學(xué)方法測定紫尾粗多

4、糖的抗氧化活性,其中包括對紫蛇尾粗多糖的還原能力的測定,對超陽離子和羥基離子的清除能力的測定以及抑制紅細(xì)胞膜脂質(zhì)過氧化能力的測定。研究結(jié)果表明,紫蛇尾粗多糖具有較強(qiáng)抗氧化能力,能有效的清除羥自由基、超氧陰離子,抑制紅細(xì)胞膜脂質(zhì)過氧化,且其抗氧化能力與劑量成正相關(guān)性。
　　采用過氧化法構(gòu)建了心肌細(xì)胞H9c2的氧化模型,測定了紫蛇尾粗多糖對H9c2氧損傷的保護(hù)作用,以及對由氧損傷引起的H9c2細(xì)胞凋亡率、線粒體膜電位、BCl-2、Ba