Toll樣受體2介導(dǎo)的JNK信號分子在小鼠支氣管哮喘發(fā)病中的作用機制.pdf

1、背景：
　　支氣管哮喘（哮喘）是多基因參與的慢性氣道變應(yīng)性疾病，是一種免疫失衡性疾病，其發(fā)病率及死亡率均呈現(xiàn)上升趨勢，造成了嚴(yán)重的醫(yī)療負(fù)擔(dān)。目前其發(fā)病機制不甚清楚，已有報道顯示Toll樣受體2（TLR2）作為Toll樣受體家族（TLRs）中的重要一員，不僅依賴胚系基因編碼的保守序列調(diào)控固有免疫應(yīng)答，而且調(diào)節(jié)適應(yīng)性免疫應(yīng)答，誘導(dǎo)免疫耐受，在支氣管哮喘的發(fā)生發(fā)展中扮演重要角色，但其具體作用及其機制并不清楚，甚至存在一定爭議。研究顯示，

2、TLR2的人工配體Pam3Cys激活DC等抗原提呈細(xì)胞，誘導(dǎo)初始型Th0細(xì)胞向Th2分化，而抑制Th1細(xì)胞的分化，從而促進實驗性哮喘的發(fā)生，另有研究則得出相反的結(jié)論。TLR2基因變異與哮喘易感性存在較大相關(guān)性。TLR2結(jié)合配體后，通過其胞內(nèi)區(qū)Toll/IL-1受體同源結(jié)構(gòu)域激活下游 c-Jun氨基末端激酶/促絲裂原活化蛋白激酶(JNK/MAPK)、NF-?B等信號分子，促進核內(nèi)轉(zhuǎn)錄因子的表達，從而介導(dǎo)細(xì)胞內(nèi)炎性因子的合成及釋放，誘導(dǎo)炎癥

3、級聯(lián)反應(yīng)。研究發(fā)現(xiàn)，JNK作為MAPK家族的重要成員，參與哮喘免疫炎癥反應(yīng)的多個環(huán)節(jié)，如氣道慢性炎癥、氣道平滑肌增厚及氣道高反應(yīng)性。前期在金黃色葡萄球菌刺激 RAW264.7肺泡巨噬細(xì)胞系的實驗中已發(fā)現(xiàn)TLR2可能活化并介導(dǎo)了JNK信號通路。而TLR2介導(dǎo)JNK信號分子參與哮喘的炎性反應(yīng)卻鮮見報道。
　　目的：
　　探討Toll樣受體2介導(dǎo)的JNK信號分子參與小鼠支氣管哮喘發(fā)病的作用機制。
　　方法：
　　健康S

4、PF級C57（TLR2野生型）鼠和TLR2基因缺失（TLR2-/-）鼠各14只，按隨機數(shù)字表法分為4組，即C57對照組、C57哮喘組、TLR2-/-對照組、TLR2-/-哮喘組，每組7只，哮喘組以卵清蛋白（OVA）腹腔注射繼而聯(lián)合1％OVA霧化吸入致敏和激發(fā)建立哮喘模型，對照組以生理鹽水代替OVA進行致敏和激發(fā)反應(yīng)。利用HE染色技術(shù)觀測各組小鼠肺組織的不同病理表現(xiàn)，利用免疫組織化學(xué)染色技術(shù)（ABC法）檢測TLR2蛋白在C57對照組、C5

5、7哮喘組肺內(nèi)的表達差異，JNK及磷酸化JNK(P-JNK)蛋白表達在各組肺內(nèi)的表達差異。
　　結(jié)果：
　　HE染色提示C57哮喘組、TLR2-/-哮喘組均較其對照組有較明顯的炎癥細(xì)胞浸潤及呼吸道平滑肌增生，而TLR2-/-哮喘組則較C57哮喘組在上述表現(xiàn)中有所減弱。以平均吸光度（mA）衡量各組織蛋白相對表達量，免疫組化結(jié)果提示TLR2蛋白在C57哮喘組表達顯著高于C57對照組（P<0.01），JNK蛋白在各組肺組織中的表達差