褐多孔菌發(fā)酵物的化學(xué)成分及抑菌活性研究.pdf

1、褐多孔菌(Polyporus pecipes)是擔(dān)子菌綱、多孔菌目、多孔菌科真菌，一般寄生于多種倒木或腐朽木上，藥用抗癌，可治療乳腺癌、前列腺癌，而幼時(shí)可食用，具有提高免疫、軟化血管、預(yù)防和延緩心臟老化、調(diào)節(jié)大腦神經(jīng)、抗衰老的作用。由于真菌代謝產(chǎn)物具有多種結(jié)構(gòu)類型和生理活性，是尋找新的天然藥物的重要來源，為了開發(fā)利用我國的真菌資源，尋找新的活性成分，本文以微生物發(fā)酵學(xué)、植物化學(xué)和現(xiàn)代化學(xué)分離理論為基礎(chǔ)，在褐多孔菌發(fā)酵液及菌絲體提取物抑菌

2、活性跟蹤檢測的前提下，利用色譜技術(shù)和現(xiàn)代分離方法對其菌絲體乙酸乙酯提取物的化學(xué)成分進(jìn)行了系統(tǒng)的分離純化。研究結(jié)果如下： 采用濾紙片法測定發(fā)酵物各部分對細(xì)菌的抑制作用。濃度為40mg/mL時(shí)，發(fā)酵物乙酸乙酯部分對7種細(xì)菌均有不同程度的抑制作用，其中菌絲體乙酸乙酯部分對蠟狀芽孢桿菌和枯草芽孢桿菌抑制效果十分顯著，對金黃色葡萄球菌和北京棒狀桿菌也有較好的抑制作用；發(fā)酵液乙酸乙酯部分對金黃色葡萄球菌和巨大芽孢桿菌抑制效果十分顯著，對枯草

3、芽孢桿菌、大腸桿菌和馬鈴薯芽孢桿菌抑制效果也很明顯，而發(fā)酵液及菌絲體的正丁醇部分對各種細(xì)菌的抑制作用均不明顯。 采用瓊脂稀釋法測定發(fā)酵物各部分對細(xì)菌的最小抑制濃度。菌絲體乙酸乙酯部分對金黃色葡萄球菌和大腸桿菌的最小抑制濃度(MIC)為2.50mg/mL，蠟狀芽孢桿菌為1.25mg/mL，枯草芽孢桿菌為0.625 mg/mL，發(fā)酵液乙酸乙酯部分對金黃色葡萄球菌和枯草芽孢桿菌最小抑制濃度為2.50mg/mL，巨大芽孢桿菌為1.25

4、mg/mL，菌絲體正丁醇部分對蠟狀芽孢桿菌最小抑制濃度為2.5mg/mL，發(fā)酵液正丁醇部分對金黃色葡萄球菌和蠟狀芽孢桿菌最小抑制濃度為2.50 mg/mL。 采用生長速率法測定發(fā)酵物各部分對病原菌的抑制作用。濃度為4mg/mL時(shí)，菌絲體乙酸乙酯部分對白菜黑斑病菌和小麥赤霉病菌抑菌率為100％，0.5 mg/mL時(shí)，對上述兩種病原菌的抑菌率分別為83.89％和76.93％；濃度為4 mg/mL時(shí)，發(fā)酵液乙酸乙酯部分對辣椒疫霉病菌、

5、黃瓜炭疽病菌、小麥赤霉病菌和棉花枯萎病菌抑菌率均為100％，0.5 mg/mL時(shí)，對小麥赤霉病菌的抑菌率仍為100％；發(fā)酵物正丁醇部分在濃度為4 mg/mL時(shí)對所有病原菌抑制效果均很顯著， 0.5 mg/mL時(shí)，菌絲體正丁醇部分對黃瓜炭疽病菌、小麥赤霉病菌和棉花枯萎病菌的抑菌率高于70％，發(fā)酵液正丁醇部分對白菜黑斑病菌和棉花枯萎病菌抑制效果顯著。從褐多孔菌菌絲體的乙酸乙酯提取物中分離得到五個(gè)單體化合物，綜合應(yīng)用GC—MS、EI—MS、<

6、'1>HNMR、<'13>CNMR、DEPT及(-)ESI-MS等現(xiàn)代波譜學(xué)方法和技術(shù)，并與標(biāo)準(zhǔn)品、文獻(xiàn)值以及圖譜庫對照，鑒定出其中的三個(gè)，化合物Ⅰ麥角甾醇過氧化物，化合物Ⅳ為1-(2，4-dihydroxy-5-methylphenyl)ethanpone，化合物Ⅴ為4，6，8(14)，22(23)-四烯-3-酮-麥角甾烷，這三種化合物均為首次從褐多孔菌中發(fā)現(xiàn)，其中1-(2，4-dihydroxy-5-methylphenyl)eth