銀杏葉黃酮的提取及其抗腫瘤活性的研究.pdf

1、銀杏葉所含化學(xué)成分非常復(fù)雜，包括黃酮類、萜類、生物堿、多糖類、酚類、氨基酸、微量元素等。銀杏葉中黃酮類化合物含量較高，其中以槲皮素、山萘酚和異鼠李素的糖苷為主。許多實驗已證實，銀杏葉黃酮類物質(zhì)具有非常廣泛的生理和藥理活性，如擴張冠狀血管、抗炎癥、抗氧化、抗病毒、調(diào)節(jié)免疫功能等。本文利用超聲浸提方法分離提取了銀杏葉總黃酮，并對總黃酮及其成分之一——槲皮素的含量、兩者的抗腫瘤活性及免疫調(diào)節(jié)作用進行了初步研究。 采用四種溶劑(水、70

2、％甲醇、70％乙醇和70％丙酮)浸提輔以超聲波處理的方法從銀杏葉磨粉中得到總黃酮，經(jīng)石油醚去色素后，利用單波長分光光度法對提取物中總黃酮的含量進行了測定。結(jié)果表明，有機溶劑的提取效率(丙酮為1.6247％，甲醇為1.3363％，乙醇為1.2451％)均比水的提取效率(1.1702％)高。用HPLC方法測定以乙醇作為溶劑提取的銀杏葉總黃酮中槲皮素的含量為0.20153％，折算為100g銀杏葉中槲皮素的含量為39.47mg。 利用M

3、TT法檢測銀杏葉黃酮和槲皮素對腫瘤細胞的生長抑制作用，結(jié)果表明銀杏葉黃酮對人肝癌細胞HepG2的生長具有抑制作用，槲皮素對HepG2和人胃癌細胞BGC823的增殖均有明顯的抑制作用，而且呈劑量時間依賴效應(yīng)。利用丫啶橙熒光染色檢測HepG2和BGC823細胞經(jīng)槲皮素處理后形態(tài)的變化，發(fā)現(xiàn)細胞均出現(xiàn)明顯的凋亡小體，表明槲皮素可誘導(dǎo)細胞發(fā)生凋亡。經(jīng)電泳檢測發(fā)現(xiàn)槲皮素處理過的腫瘤細胞DNA呈現(xiàn)DNAladder樣。此外利用流式細胞術(shù)檢測到槲皮素

4、將HepG2和BGC823細胞周期阻斷在G0/G1期。 體外銀杏葉黃酮和槲皮素都對正常小鼠靜息脾臟細胞的增殖無明顯影響，而與ConA或LPS共同作用時對脾臟細胞的增殖有抑制作用，且呈濃度依賴性。荷S-180昆明小鼠實體瘤實驗表明，腹腔注射劑量為100mg/kg體重的槲皮素對S180實體瘤的抑瘤率為23.39％，脾臟指數(shù)和胸腺指數(shù)與正常小鼠對照均變小。這些結(jié)果表明槲皮素對實體瘤的抑制可能是通過直接的細胞毒作用，而不是通過免疫系統(tǒng)。