黑曲霉P-6021產(chǎn)酸性果膠酶及其應(yīng)用和螺孢菌ZG9901產(chǎn)堿性果膠酶研究.pdf

1、浙江大學(xué)博士學(xué)位論文黑曲霉P-6021產(chǎn)酸性果膠酶及其應(yīng)用和螺孢菌ZG9901產(chǎn)堿性果膠酶研究姓名：鐘衛(wèi)鴻申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專業(yè)：生物化學(xué)工程指導(dǎo)教師：岑沛霖2001.1.1浙江大學(xué)博士學(xué)位論文 摘 要和P M G L 產(chǎn)生。發(fā)酵3 6 - - 4 8 h 是產(chǎn)酶高峰期，四種酶都達(dá)到最大。酸性蛋白酶的存在會(huì)導(dǎo)致果膠酶在應(yīng)用中失活。黑曲霉P 一6 0 2 1 發(fā)酵產(chǎn)生的果膠酶最適酶解條件是p H 3 ．6 ，5 0 ℃，3 0 m i n

2、 。根據(jù)果膠酶性質(zhì)應(yīng)用于蘋果制汁和澄清均取得了顯著的效果。正交試驗(yàn)獲得蘋果酶法制汁最佳條件：酶量3 0 0 U ／5 0 9 ，p I - - 1 3 ．6 ，4 5 ℃，6 0 m i r a蘋果酶法澄清最佳條件：1 4 0 U 1 1 0 0 m l ，5 0 ℃，1 2 0 m i n 。另外還發(fā)現(xiàn)果膠酶和纖維素酶共同作用效果優(yōu)于單果膠酶，澄清度由9 2 ％提高到9 5 ．8 ％，粘度由1 ．6 2 降至l 4 1 。首次進(jìn)行了固

3、定化黑曲霉同時(shí)產(chǎn)酶澄清蘋果汁試驗(yàn)。采用多孔聚氨酯泡沫固定化黑曲霉P ．6 0 2 1 成功實(shí)現(xiàn)了菌絲體的重復(fù)利用，5 個(gè)批次后固定化菌體產(chǎn)酶量上升，發(fā)酵液酶活達(dá)到6 6 4 U ／m l 。以蘋果汁基質(zhì)發(fā)酵1 2 h后，固定化黑曲霉產(chǎn)酶量達(dá)到6 4 3 U ／m l ，而以海藻酸鈣再包埋的固定化菌體產(chǎn)酶量也達(dá)到3 3 3 U ／m l ，后者在2 0 h 后達(dá)到5 6 1 U ／m l ，透光率為9 8 ．4 ％，蘋果汁基本澄清。試驗(yàn)表

4、明固定化黑曲霉搖瓶間歇同時(shí)產(chǎn)酶澄清蘋果汁工藝是可行的，達(dá)到了同時(shí)產(chǎn)酶澄清的效果。提示了固定化霉菌可以進(jìn)一步應(yīng)用于連續(xù)產(chǎn)酶澄清蘋果汁。進(jìn)行了適于棉麻加工的堿性果膠酶產(chǎn)生菌的篩選，獲得一株產(chǎn)堿性果膠酶放線菌新菌株Z G 9 9 0 1 ，經(jīng)鑒定屬游動(dòng)放線菌科的@ i r i l l o s p o r a s p ．?？疾炝司w生長(zhǎng)行為，發(fā)現(xiàn)菌體生長(zhǎng)過程首先表現(xiàn)為孢子萌發(fā)為菌絲，進(jìn)而形成菌絲球，菌絲生長(zhǎng)至穩(wěn)定期的中后期開始大量產(chǎn)生孢子，菌體

5、產(chǎn)孢可以通過形成孢子囊或直接在菌絲頂端脫落產(chǎn)生孢子。Z G 9 9 9 菌株生產(chǎn)堿性果膠酶研究結(jié)果表明，果膠底物、碳源、氮源、微量元素、生長(zhǎng)因子和表面活性劑等均對(duì)產(chǎn)堿性果膠酶有較大影響。搖瓶發(fā)酵的初始p H 、培養(yǎng)溫度、裝量和接種量等也對(duì)產(chǎn)酶有重要影響。經(jīng)優(yōu)化搖瓶發(fā)酵最佳培養(yǎng)條件為：果膠2 ％，乳糖2 ％，蛋白胨0 ．3 ％，酵母膏O 4 ％，K H 2 P O , 0 ．1 ％，M g S o d ．7 1 - 1 2 00 ．0 0