紅棗果膠性質(zhì)研究及產(chǎn)紅棗果膠酶菌株的篩選鑒定.pdf

1、分類號(hào)：密級(jí)：T$2013公開單位代碼：10086紅棗果膠性質(zhì)研究及產(chǎn)紅棗果膠酶菌株的篩選鑒定AnalysisofJujubePectinPropertiesandScreeningofHighYieldJujubePectinEnzymeStrains學(xué)位申請(qǐng)人：張玉杰指導(dǎo)教師：王頡教授學(xué)科專業(yè)：農(nóng)產(chǎn)品加工及貯藏工程學(xué)位類別：工學(xué)碩士授予單位：河北農(nóng)業(yè)大學(xué)答辯日期：二。一六年五月二十九日摘要2014年我國(guó)紅棗產(chǎn)量大幅提高，約為7345

2、3萬(wàn)噸，但紅棗主產(chǎn)區(qū)卻面臨著不同程度的紅棗滯銷，給農(nóng)民帶來(lái)了嚴(yán)重?fù)p失。紅棗濃縮汁加工是延長(zhǎng)紅棗產(chǎn)業(yè)鏈，提高棗產(chǎn)業(yè)效益的主要途徑之一，但由于紅棗富含果膠，制汁過(guò)程需要使用果膠酶，而目前國(guó)內(nèi)缺少針對(duì)紅棗果膠性質(zhì)開發(fā)的果膠酶，大型果品加工企業(yè)使用的果膠酶是進(jìn)口法國(guó)的用于)jnv_濃縮蘋果汁的酶制劑，不適合處理紅棗果實(shí)，導(dǎo)致果汁超濾困難，成為限制紅棗濃縮汁工業(yè)化生產(chǎn)的瓶頸。為針對(duì)紅棗果膠性質(zhì)開發(fā)適合紅棗濃縮汁生產(chǎn)的果膠酶，本研究以阜平大棗為原料

3、，制備紅棗果膠，研究其理化性質(zhì)、單糖組成及與商品果膠的區(qū)別，并以棗園里的土壤和腐爛棗作為篩選菌株的來(lái)源，利用紅棗果實(shí)中提取的果膠作為唯一的碳源進(jìn)行初篩，再利用酶活測(cè)定法進(jìn)行復(fù)篩，得到果膠酶產(chǎn)酶活力高的菌株，并對(duì)其進(jìn)行分子生物學(xué)鑒定，主要研究結(jié)果如下：1以阜平大棗為原料，采用超聲波輔助鹽酸提取、乙醇沉淀法獲得紅棗果膠，并對(duì)紅棗果膠和商品果膠進(jìn)行理化分析。結(jié)果表明：紅棗果膠符合果膠的表觀特征；紅棗果膠總灰分為425％，灰分中鹽酸不溶物含量為

4、10％，水分含量為706％，溶解度為792％，酯化度為5490％，pH為27，透明度為6272％，半乳糖醛酸含量為7013％。紅棗果膠的色差值為：L=3248士010、a=1351士009、b=1507士011。紅棗果膠和商品果膠的明顯不同是紅棗果膠屬于高甲氧基果膠，商品果膠屬于低甲氧基果膠：紅棗果膠屬于高酯果膠，商品果膠屬于低酯果膠。2測(cè)紅棗果膠和商品果膠的單糖組成進(jìn)行分析。紅棗果膠和商品果膠都是由甘露糖、鼠李糖、葡萄糖、半乳糖、阿拉

5、伯糖和半乳糖醛酸等組成的雜多糖，紅棗果膠和商品果膠在單糖組成上無(wú)明顯不同；紅棗果膠中含有乙酰基，商品果膠中不含有乙酰基；紅棗果膠和商品果膠的紅外圖譜基本一致，說(shuō)明紅棗果膠具有典型的果膠紅外吸收；紅棗果膠和商品果膠呈片狀結(jié)構(gòu)，上面附著大小不等的顆粒狀聚集體，大小在O1～15岬范圍內(nèi)。3以紅棗果膠為唯一碳源，從保定市阜平縣采集的腐爛紅棗、土壤等中篩選、分離純化出一株高產(chǎn)紅棗果膠酶的菌株。該菌株編號(hào)為M3，該菌株在30℃，搖床轉(zhuǎn)速為160r／

6、rnin條件下的PDB種子培養(yǎng)基中培養(yǎng)24h后，接種于同等培養(yǎng)條件下的基礎(chǔ)培養(yǎng)基后，培養(yǎng)96h后，其果膠酶活性可達(dá)94115U／mL。采用CTAB法提取其基因組總DNA，利用真菌的通用引物ITSI和ITS4擴(kuò)增菌株的rDNAITS區(qū)序列，擴(kuò)增產(chǎn)物純化后進(jìn)行測(cè)序。將測(cè)序結(jié)果在GenBank中進(jìn)行同源性搜索，并下載部分具有代表性菌種的ITS序列，利用軟件MEGA6構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹，通過(guò)序列分析，該菌株鑒定為白地霉(Galactomycesca