小鼠胚胎干細胞建系及人胚胎干細胞培養(yǎng)體系的建立初探.pdf

1、胚胎干細胞(embryonicstemcells，ESC)是從植入前的胚胎內(nèi)細胞團(Innermasscells，ICM)或原始生殖細胞(Primordialgermcells，PGCs)分離和克隆的具有多潛能性細胞。胚胎干細胞的發(fā)現(xiàn)為研究細胞分化，動物和人發(fā)育機制，闡明基因功能，篩選藥物，細胞治療疑難雜癥等開辟了廣闊的空間。胚胎干細胞的建系工作，是任何干細胞研究的基礎。優(yōu)良的建系方法和穩(wěn)定的培養(yǎng)體系，為后期各種實驗鋪墊了道路。本實驗進

2、行了大量的方法和技術上的探索，旨在建立小鼠和人胚胎干細胞系。 本文闡述了人胚胎干細胞建系的研究進展。其建系和維持過程中，胚胎材料來源、內(nèi)細胞團分離、擴增傳代、凍存復蘇等均為難點。從鼠源飼養(yǎng)層、人源飼養(yǎng)層到無飼養(yǎng)層培養(yǎng)系統(tǒng)的發(fā)展，以及體細胞核移植技術平臺的建立，奠定了治療性克隆的基礎。同時，從進一步闡述了胚胎干細胞保持自我更新的分子機制的研究進展，旨在從分子層面了解生長和分化的原因并進一步探索好的建系方法。胚胎干細胞通過特殊內(nèi)源性

3、分子的表達，以及微環(huán)境中多種細胞因子和胞外基質的刺激，構成信號網(wǎng)絡，共同調(diào)控自我更新。近年來，通過對Oct3/4、Nanog等胚胎干細胞特殊分子標記，以及LIF-STAT3，Wnt-β-連環(huán)素，BMP-Id，bFGF等信號通路的研究，探討了胚胎干細胞自我更新信號網(wǎng)絡的分子機制。維持自我更新的關鍵在于胚胎干細胞生長微環(huán)境中的各種細胞因子和胞外基質的含量，以及細胞內(nèi)源性特異分子表達量之間的平衡。最后，筆者就人胚胎的來源、胚胎干細胞的研究目的