以12個柑橘四倍體為父本倍性雜交培育三倍體.pdf

1、選育品質(zhì)優(yōu)良的無核果實是柑橘育種者的主要目標。因為減數(shù)分裂過程發(fā)生異常，三倍體柑橘無法形成正常類型配子而高度不育，是天然的無核類型。倍性雜交是獲得三倍體無核柑橘的重要途徑之一。本研究主要以性狀優(yōu)良但多籽的二倍體柑橘品種作母本，與雙二倍體或異源四倍體體細胞雜種作父本進行倍性雜交，并結合胚挽救及流式細胞儀倍性鑒定，以期培育一批具有優(yōu)良性狀的柑橘三倍體有性后代，為選育無核柑橘新品種及其相關研究提供豐富的實驗材料。主要實驗結果如下:
　　

2、1.以單胚性二倍體品種作母本的2X×4X雜交組合創(chuàng)制柑橘三倍體。以沙田柚等6個單胚性二倍體為母本與5個異源四倍體和2個雙二倍體為父本進行雜交，配置得到11個雜交授粉組合。從299個授粉果實中共剝?nèi)?526粒種子，經(jīng)胚挽救獲得362株再生植株，對全部再生植株倍性鑒定后得到285株三倍體和2株四倍體植株，三倍體發(fā)生率為78.73％，四倍體發(fā)生率為0.55％。目前，所有成活的三倍體和四倍體植株均已移栽至溫室，絕大部分植株已嫁接至田間。利用篩選

3、獲得的7對多態(tài)性SSR引物，對沙田柚×4X椪柑等2個組合的36個雜交后代植株進行遺傳鑒定，結果表明16株二倍體植株為非雜種后代，20株三倍體植株為雙親的有性后代。
　　2.以多胚性二倍體作母本的2X×4X倍性雜交組合創(chuàng)制柑橘三倍體。以W.默科特橘橙等4個多胚性二倍體為母本，與9個四倍體父本材料進行有性雜交，配置得到11個雜交授粉組合。對2015-2016年829個幼果的8181粒種子進行離體培養(yǎng)后得到2697株再生植株。經(jīng)倍性鑒定

4、共得到185株多倍體，其中三倍體植株107株，占多倍體的57.84％;四倍體植株78株，占多倍體的42.16％，已經(jīng)成活的三倍體植株和四倍體植株均已移栽至溫室，部分生長健壯的多倍體已嫁接至田間。2017年以W.默科特橘橙為母本的雜交組合，對223個幼果的2122粒種子進行胚挽救，目前胚狀體仍在誘導生芽與生根階段，暫未獲得多倍體植株。在胚挽救的過程中發(fā)現(xiàn)，從植株下胚軸和幼嫩的胚狀體周圍長出許多胚性愈傷組織，且父本材料不同，其愈傷組織的胚性

5、發(fā)生能力不同。將這些胚性愈傷組織在MT固體培養(yǎng)基多次繼代后發(fā)現(xiàn)其胚胎發(fā)生能力也逐漸減弱。經(jīng)倍性鑒定，12個不同株系的愈傷組織為二倍體，1個為二倍體和三倍體的混倍體，遺傳雜合性有待后續(xù)鑒定。目前這些胚性愈傷組織已被用作本課題組相關研究的實驗材料。此外，利用篩選獲得的3對多態(tài)性SSR引物，對本地早橘×4X椪柑組合的雜交后代植株進行遺傳鑒定，結果表明29株三倍體植株為雙親的有性后代，1株四倍體植株為母本珠心細胞加倍形成的雙二倍體。