桑黃菌絲體多糖的分離、純化及結構初探.pdf

1、桑黃(Phellinus linteus)是目前已知抗癌效果顯著的藥用真菌，其主要功效成分是多糖。由于人類的大量采摘，使得野生桑黃資源緊缺，因此需要人工培養(yǎng)來獲得大量菌絲體來滿足市場的需求。近年來對桑黃培養(yǎng)基的研究較多，但是對桑黃多糖分離純化的研究較少。
　　 本文在桑黃液體培養(yǎng)過程中跟蹤檢測各項生理指標的變化，對桑黃菌絲體主要營養(yǎng)成分進行測定與分析；采用超聲波前處理與熱水浸提相結合的方法提取菌絲體多糖；運用大孔吸附樹脂脫除粗多

2、糖中的蛋白質；以DEAE纖維素陰離子交換柱和葡聚糖凝膠柱為載體分離純化得到的多糖，對純化后的各組分進行紫外掃描，利用氣相色譜檢測多糖的單糖組成。試驗主要得出以下結論：
　　 (1)在150mL裝液量、10％接種量、28℃、160r/min的培養(yǎng)條件下，桑黃菌的生長呈一定的周期性；菌絲生長量在168h達到最大13.898g/L;發(fā)酵液中的pH值先下降，然后上升，最后穩(wěn)定于5.5左右；還原糖含量呈“拱”形變化趨勢，在120h達到最高

3、5.75g/L;氨基態(tài)氮含量先是緩慢上升，72h開始急劇下降，96h之后趨于穩(wěn)定。菌絲體主要營養(yǎng)成分測定結果為：粗蛋白含量為27.21％，粗纖維含量為9.56％，粗脂肪含量為2.67％，灰分為9.16％，總糖和還原糖含量分別為6.33mg/mL和0.46mg/mL。
　　 (2)采用響應面方法研究超聲波輔助提取粗多糖的工藝條件，得到最佳工藝條件為：超聲時間46min、超聲功率492W及液固比為21時，粗多糖得率為0.71％。

4、r>　　 (3)靜態(tài)試驗篩選出D-101-I樹脂對蛋白質的吸附效果最好，動態(tài)試驗結果表明：吸附飽和時間為4h，飽和吸附量為0.3mg/mL，洗脫劑以乙醇為最佳，最佳洗脫濃度為50％;在上樣量濃度為0.3mg/mL，pH自然，流速為1mL/min，上樣量為2個柱體積(BV)時蛋白的吸附率達到90％;50％乙醇做洗脫劑，用量為2BV時，對蛋白洗脫率較低，且可純化濃縮多糖。
　　 (4)經(jīng)DEAE-纖維素初步分離純化得到了三個組分A