藍(lán)莓葉多酚分離純化、結(jié)構(gòu)及抗氧化活性的研究.pdf

1、藍(lán)莓葉多酚具有抗氧化、抗病毒、抗腫瘤、抗糖尿病、降血壓、血脂等功能。在我國，對(duì)藍(lán)莓葉多酚的研究報(bào)道和開發(fā)利用較少，藍(lán)莓葉多作為廢棄物處理，造成了資源的浪費(fèi)。研究藍(lán)莓葉多酚的提取純化工藝，分析其組成對(duì)藍(lán)莓葉原料的天然藥物和功能性食品的研究開發(fā)有重要意義。本文以南京地區(qū)兔眼藍(lán)莓葉為對(duì)象，進(jìn)行了多酚的提取、純化、分離、結(jié)構(gòu)鑒定及體外抗氧化活性的研究和探討，為實(shí)現(xiàn)藍(lán)莓葉的綜合利用提供理論依據(jù)。
　　1.采用響應(yīng)面法優(yōu)化了藍(lán)莓葉多酚的提取工

2、藝，得到的最佳工藝為:乙醇濃度62.05％,提取溫度67.54℃，料液比為1∶23.65，提取時(shí)間為2.06h。在此條件下，提取率達(dá)到89.02％。同時(shí)建立了醇提藍(lán)莓葉多酚的二次數(shù)學(xué)模型，對(duì)藍(lán)莓葉多酚提取具有良好的預(yù)測(cè)作用。
　　2.比較了八種大孔樹脂對(duì)藍(lán)莓葉多酚的靜態(tài)吸附與解析性能。結(jié)果表明:HPD400大孔樹脂最適合藍(lán)莓葉多酚的純化，當(dāng)上樣濃度為3mg/mL，pH為2，上樣流速為2mL/min時(shí)，HPD400樹脂對(duì)藍(lán)莓葉多酚的

3、吸附量較大，為140mL。用80mL40％乙醇以1mL/min的流速進(jìn)行洗脫時(shí)，解析效果較好，解析率為90.50％,且峰形對(duì)稱性較好，無明顯的拖尾現(xiàn)象。經(jīng)過HPD400樹脂的純化，藍(lán)莓葉多酚的純度由原來的38.75％提高到69.38％。
　　3.采用采用高效液相色譜/二級(jí)陣列管/電噴霧電離源/串聯(lián)質(zhì)譜(HPLC-DAD-ESI-MStandem)對(duì)藍(lán)莓葉多酚進(jìn)行分析，結(jié)果表明，藍(lán)莓葉多酚的主要組分為:低聚原花青素（A型原花青素二聚

4、體，B型原花青素二聚體、三聚體），綠原酸及其衍生物（新綠原酸、隱綠原酸、二咖啡?？崴幔?，槲皮素及其衍生物（蘆丁、槲皮素-3-O-己糖苷、槲皮素-3-O-戊糖苷、槲皮素-3-O-葡萄糖醛酸、槲皮素-3-O-（4"-3-羥基-3-甲基戊二）-鼠李糖苷），山奈酚及其衍生物（山奈酚-3-O-蕓香糖苷、山奈酚-3-O-己糖苷、山奈酚-3-O-葡萄糖醛酸、山奈酚-（4"-3-羥基-3-甲基戊二）-鼠李糖苷），和兩種對(duì)香豆酰奎尼酸。
　　4.

5、采用硅膠柱層析和葡聚糖凝膠SephadexLH20對(duì)大孔樹脂純化后的藍(lán)莓葉多酚進(jìn)行反復(fù)過柱分離，得到3個(gè)單體C1，C2，C3。采用質(zhì)譜和核磁共振(1HHMR、13CHMR)鑒定為山奈酚、槲皮素和槲皮素-3-O-半乳糖苷（金絲桃苷）。
　　5.采用體外實(shí)驗(yàn)綜合評(píng)價(jià)了藍(lán)莓葉各組分的ABTS自由基清除能力，DPPH自由基清除能力，羥自由基清除能力，超氧陰離子自由基清除能力，亞硝酸鹽清除能力，還原力，F(xiàn)RAP值和ORAC值。結(jié)果證明藍(lán)莓葉