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1、本文利用一步法基因缺失方法,敲除了產(chǎn)毒性大腸桿菌(Enterotoxic Escherichia coli,ETEC)10407菌株的tatABC基因,研究了該基因?qū)TEC10407的生理和致病力的影響。 研究發(fā)現(xiàn),tatABC基因缺失后,ETEC10407出現(xiàn)形態(tài)學(xué)改變,在顯微鏡下表現(xiàn)為串狀排列;在LB液體培養(yǎng)基的生長(zhǎng)速度明顯變慢;使用半固體培養(yǎng)基技術(shù)發(fā)現(xiàn),其動(dòng)力喪失。在使用家兔腸段結(jié)扎試驗(yàn)發(fā)現(xiàn),tatABC基因缺失后,ET
2、EC10407菌株產(chǎn)生腸段液體蓄積及腸粘膜損傷的能力減弱。上述表現(xiàn)在tatABC缺失株重新獲得克隆到質(zhì)粒上的tatABC基因后基本恢復(fù)。 采用蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù),研究了tatABC基因缺失對(duì)ETEC10407表達(dá)蛋白的影響。通過(guò)使用雙向電泳分離菌體和上清蛋白成分,使用MALDI-TOF-MS對(duì)分離的蛋白進(jìn)行了鑒定,發(fā)現(xiàn)tatABC基因缺失株有15個(gè)低表達(dá)蛋白的。研究發(fā)現(xiàn),tatABC基因缺失影響鞭毛素的表達(dá),可能和動(dòng)力喪失的表現(xiàn)型有
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