豬圓環(huán)病毒Ⅱ型毒株的分離鑒定與免疫原性初步分析.pdf

1、豬圓環(huán)病毒2型(Porcine circovirus2，PCV-2)是危害養(yǎng)豬業(yè)健康發(fā)展的主要病原，可引起仔豬多系統(tǒng)衰竭綜合征、豬皮炎腎炎綜合征、仔豬先天性震顫、母豬繁殖障礙等多種疫病，常給養(yǎng)豬業(yè)造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失。針對該病毒引起的豬群疫病，本文利用分離鑒定的PCV2貴州毒株進(jìn)行了滅活疫苗相關(guān)研究，以期為該病的有效防控提供技術(shù)支持。
　　1、PCV2貴州株的分離鑒定應(yīng)用ELISA與PCR方法對臨床病料進(jìn)行檢測，取陽性組織樣本進(jìn)行研

2、磨、離心和過濾除菌后，接種PK-15細(xì)胞，經(jīng)PCR檢測、免疫熒光分析和透射電鏡觀察，證實(shí)分離到三株P(guān)VC貴州株，與國產(chǎn)疫苗毒株進(jìn)化關(guān)系較近。
　　2、PCV2免疫抗原的制備通過優(yōu)化D-氨基葡萄糖添加濃度、病毒接種量優(yōu)化及病毒最佳收毒期，獲得大量的PVC病毒，超濾濃縮后滅活。結(jié)果顯示:當(dāng)D-氨基葡萄糖添加濃度為3mmol/L、病毒接種量為2.5％時(shí)，37℃培養(yǎng)72小時(shí)時(shí)病毒的TCID50最高;用終濃度為0.1％甲醛滅活病毒，經(jīng)36