枯草芽孢桿菌產(chǎn)γ-聚谷氨酸的發(fā)酵條件研究.pdf

1、本論文主要就枯草芽孢桿菌產(chǎn)γ-聚谷氨酸的發(fā)酵條件進(jìn)行了研究。 為了使γ-聚谷氨酸的分析方便快捷，研究了γ-聚谷氨酸的分析條件，以甲醇作為γ-PGA的凝聚劑，確定了發(fā)酵液與凝聚劑體積比，離心機(jī)轉(zhuǎn)速及HPLC法測定方法。 為降低γ-PGA的生產(chǎn)生產(chǎn)成本，提高γ-PGA的產(chǎn)量，以味精粗料作為γ-PGA的合成前體，并優(yōu)化了發(fā)酵培養(yǎng)基配方，確定1Lγ-PGA發(fā)酵培養(yǎng)基成分為：蔗糖70g，蛋白胨5g，味精粗料266ml，NaCl30

2、g，pH7.0。發(fā)酵條件：搖床轉(zhuǎn)速220rpm，37℃。γ-PGA積累到24h達(dá)到最大產(chǎn)量41.7g/L，為文獻(xiàn)報(bào)道值的2倍。 通過響應(yīng)面法對γ-聚谷氨酸金屬離子發(fā)酵培養(yǎng)基進(jìn)一步優(yōu)化。應(yīng)用Plackett-Burman實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)10個(gè)因素中挑選出3個(gè)主要影響因素，然后用中心組合設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)RSM將三個(gè)因素再次優(yōu)化，得到在Ca2+、Mg2+和K+的相應(yīng)濃度分別為3.27mmol/l、2.35mmol/1和4.13mmol/l的時(shí)候，γ-

3、聚谷氨酸的產(chǎn)量最高。3次重復(fù)實(shí)驗(yàn)的結(jié)果取均值51.4g/l(i.e.，51.4，51.2和51.6g/1)。 毛細(xì)管電泳間接紫外檢測聚谷氨酸發(fā)酵液中的蔗糖?？疾炝嗽摲椒ㄖ斜尘熬彌_液的選擇及其濃度和pH值、分離電壓、溫度等因素對樣品響應(yīng)值和遷移時(shí)間的影響，獲得了優(yōu)化的電泳工作條件。最佳的操作條件為：以濃度為30mM、pH11.0的對氨基水楊酸作為背景緩沖液，分離電壓15kV，操作溫度25℃。在此條件下，電泳分離在6.661min內(nèi)