腺病毒介導(dǎo)gax基因轉(zhuǎn)染對血管平滑肌細(xì)胞生物學(xué)行為的影響及機(jī)制探討.pdf

1、背景和目的:同源盒基因在胚胎發(fā)育中調(diào)節(jié)細(xì)胞的生長、分化和遷移,gax(growth arrest homeobox)基因是一個主要存在于心血管系統(tǒng)的同源盒基因.血管壁中g(shù)ax基因表達(dá)在球囊損傷后快速下調(diào),在受有絲分裂原刺激后由G<,0>期向G<,1>期轉(zhuǎn)變的血管平滑肌細(xì)胞(VSMC)中也明顯降低,其降低程度與有絲分裂原刺激DNA合成的能力有關(guān).gax基因在VSMC中的這種表達(dá)模式與gas(growth arrest-specific)基

2、因和gadd(growth arrest and DNAdamage-inducible)基因相似,后二者中的一些基因表達(dá)增強(qiáng)時可抑制細(xì)胞生長,說明gax基因?qū)SMC的生長和增殖可能起著抑制作用.考慮到VSMC的增殖、遷移以及凋亡失調(diào)在血管成形術(shù)后再狹窄病灶新生內(nèi)膜形成中起著重要作用,該實(shí)驗(yàn)通過構(gòu)建攜帶gax基因的重組腺病毒載體并轉(zhuǎn)染體外培養(yǎng)的VSMC,研究gax基因表達(dá)增強(qiáng)后VSMC增殖、遷移和凋亡等生物學(xué)行為所受影響及其機(jī)制,從而

3、探討增強(qiáng)gax基因表達(dá)對血管成形術(shù)后再狹窄的作用和意義.結(jié)論:1.PDGF-BB刺激使gax基因在細(xì)胞轉(zhuǎn)錄和翻譯水平的表達(dá)均下降,且隨PDGF-BB濃度的升高,gax基因表達(dá)下降程度更加顯著.2.該實(shí)驗(yàn)構(gòu)建的復(fù)制缺陷型腺病毒重組體AdCMV-gax轉(zhuǎn)染VSMC后可顯著增強(qiáng)gax基因在VSMC的表達(dá).3.AdCMV-gax轉(zhuǎn)染使VSMC表達(dá)gax增強(qiáng)后,可抑制由有絲分裂原刺激所引起的VSMC增殖.gax基因抑制VSMC增殖的機(jī)制與其增強(qiáng)p

4、21和p27表達(dá)、抑制CDK2和PCNA的活性有關(guān);gax基因?qū)x43表達(dá)的調(diào)控,使正常的細(xì)胞間連接通訊得到維護(hù),也是其抑制VSMC增殖的重要機(jī)制.4.AdCMV-gax轉(zhuǎn)染使VSMC表達(dá)gax增強(qiáng)后,可抑制由有絲分裂原刺激所引起的VSMC遷移.gax基因抑制VSMC遷移的作用可通過抑制MMP2的表達(dá)和骨橋蛋白的轉(zhuǎn)錄來實(shí)現(xiàn).5.AdCMV-gax轉(zhuǎn)染使VSMC表達(dá)gax增強(qiáng)后,可促進(jìn)有絲分裂原刺激后的VSMC凋亡,但對靜止期細(xì)胞無促進(jìn)