A族乙型溶血性鏈球菌耐藥性和分子流行病學(xué)調(diào)查研究.pdf

1、A族乙型溶血性鏈球菌（group A streptococcus pyogens，GAS）是鏈球菌中致病性較強的一種細(xì)菌，是急性呼吸道感染尤其是上呼吸道感染的重要致病原，可以引起急性扁桃體炎、猩紅熱和膿皰瘡，也可引起嚴(yán)重的侵襲性感染如敗血癥、壞死性筋膜炎和鏈球菌中毒休克綜合征。然而，隨著大環(huán)內(nèi)酯類抗生素的廣泛使用，近十年來GAS對大環(huán)內(nèi)酯類抗生素的耐藥已經(jīng)成為全球性關(guān)注的問題，細(xì)菌耐藥性的增長已經(jīng)成為臨床治療中的棘手問題。 M

2、蛋白是GAS的主要致病因子，由emm基因編碼。M蛋白抗原變異是M分型的基礎(chǔ)，到目前為止，根據(jù)M蛋白抗原特異性可將GAS分為100多個型別，不同的型別其致病性不同，部分菌株感染可引起人類嚴(yán)重并發(fā)癥如風(fēng)濕熱/風(fēng)濕性瓣膜性心臟?。≧F/RHD）及急性腎小球腎炎等，因此，GAS分型對流行病學(xué)研究有重要意義。然而，GAS對大環(huán)內(nèi)酯類抗生素的耐藥性及分子流行病學(xué)的大規(guī)模研究在國內(nèi)報道甚少，而重慶地區(qū)尚缺乏兒童GAS分離株耐藥性和分子流行病學(xué)大規(guī)模調(diào)

3、查研究。 目的：了解重慶地區(qū)GAS耐藥特點；了解重重地區(qū)GAS的emm基因分布特點；分析重慶地區(qū)emm基因的主導(dǎo)型和感染性GAS的emm基因與疾病的關(guān)系。 方法：收集我院住院患兒正常無菌部位血液、膿液、胸水標(biāo)本及我院門診患兒咽部、皮損部標(biāo)本及健康兒童咽部咽拭子標(biāo)本進行培養(yǎng)、分離、鑒定A族乙型溶血性鏈球菌。微量肉湯稀釋法檢測A族乙型溶血性鏈球菌對8種抗生素的敏感性。聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）擴增并進行測序從而對emm基因進行分

4、型確定emm基因的型別。 結(jié)果： （一）感染性GAS菌株組成 85株非侵襲性感染GAS菌株，急性扁桃體炎菌株為77株；猩紅熱為7株；膿皰瘡的菌株為1株。5株侵襲性感染GAS菌株，2株為血培養(yǎng)分離株；2株為腹股溝膿腫的膿液培養(yǎng)分離株；1株為肺炎的胸腔積液培養(yǎng)分離株。 （二）GAS菌株對8種抗菌素的敏感性試驗結(jié)果 1、85株非侵襲性感染GAS菌株對抗菌藥的敏感性試驗結(jié)果 85株非侵襲性感染GA

5、S菌株對大環(huán)內(nèi)酯類抗生素和克林霉素的耐藥率在91.67％-97.62％；對四環(huán)素的耐藥+中介為75％；對青霉素和頭孢菌素類及左氧氟沙星的敏感率均高達(dá)100％，未檢測到耐青霉素、頭孢菌素類抗生素GAS菌株。 2、5株侵襲性感染GAS菌株對抗菌藥的敏感性試驗結(jié)果 5株侵襲性GAS菌株對大環(huán)內(nèi)酯類抗生素如紅霉素、克拉霉素以及克林霉素的耐藥率均高達(dá)100％，對新一代的大環(huán)內(nèi)酯類藥如阿奇霉素的耐藥率也高達(dá)80％；對四環(huán)素耐藥+中介

6、為80％；而對于青霉素、頭孢呋辛和左氧氟沙星的敏感率仍為100％。 3、95株健康兒童攜帶GAS菌株對抗菌藥的敏感性試驗結(jié)果 95株健康兒童攜帶GAS菌株對大環(huán)內(nèi)酯類抗生素的耐藥率在94.74％-96.84％；對四環(huán)素耐藥+中介為86.31％；對青霉素、頭孢呋辛和左氧氟沙星的敏感率均高達(dá)100％。 （三）emm基因分型結(jié)果 1、83株非侵襲性感染GAS菌株的emm基因分型結(jié)果：83株非侵襲性感染GAS菌株

7、中，最常見的型別為emm12.0，為52株，占62.65％；其次是emm1.0，為11株，占13.25％；再次是emm22.0，為8株，占9.64％；emm6.5和emm12.43均為2株，占2.41％；而emm63.0、emmSTG485.0、emmST1815.0、emm3.1、emm80.0. emm86.1、emm75.0和emm102.2均為1株，僅占1.20％。 2、5株侵襲性感染GAS菌株的emm基因分型結(jié)果：5株

8、侵襲性感染GAS菌株中3株為emm12.0；1株為emm1.0；1株無法分型。 3、84株健康兒童攜帶GAS菌株的emm基因分型結(jié)果：84株健康兒童攜帶GAS菌株中，最常見的型別為emm12.0，為54株，占64.29％；其次是emm22.0，為13株，占15.48％；再次是emm6.0，為6株，占7.14％；emm1.0和emm4.0均為5株，占5.95％；而emm12.21為1株，僅占1.19％。 （四）來源于各病種

9、的GAS與emm基因分型的對應(yīng)關(guān)系結(jié)果檢測扁桃體炎GAS菌株75株，以emm12.0所占比例最大為62.67％，然后依次是emm1.0（12.00％），emm22.0（10.67％）等。膿皰瘡GAS菌株1株，為emm75。猩紅熱GAS菌株7株，其中5株為emm12.0，2株為emm1.0。敗血癥GAS菌株2株為emm12.0和emm1.0；腹股溝膿腫GAS菌株2株為emm12.0和無法分型；肺炎GAS菌株1株為emm12.0。

10、結(jié)論： （1）重慶地區(qū)兒童GAS菌株對大環(huán)內(nèi)酯類抗生素表現(xiàn)出嚴(yán)重的耐藥，而對青霉素和頭孢菌素仍然保持高度敏感，故臨床推薦首選青霉素和頭孢菌素類（頭孢Ⅰ、Ⅱ代）抗生素治療GAS疾病。 （2）重慶地區(qū)兒童感染性GAS菌株emm基因以emm12.0為主導(dǎo)型，其次為emm1.0、emm22.0等；健康兒童攜帶GAS菌株emm基因也以emm12.0為主導(dǎo)型，其次為emm22.0、emm6.0、emm1.0和emm4.0等。為此可進