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1、背景:在多細(xì)胞生物,細(xì)胞間的差異是通過(guò)在不對(duì)稱分裂來(lái)獲得,這種不對(duì)稱分裂即體現(xiàn)了細(xì)胞的極性。胚胎干細(xì)胞的不對(duì)稱分裂,對(duì)自身干細(xì)胞數(shù)目的穩(wěn)定和組織動(dòng)態(tài)平衡和修復(fù)發(fā)揮了重要的作用。目前多種極性分子參與了此分化過(guò)程,篩選出這些極性分子對(duì)于了解細(xì)胞極性的建立和機(jī)制至關(guān)重要。
目的:以胚胎干細(xì)胞為研究胚胎發(fā)育學(xué)的工具,篩選出能調(diào)控細(xì)胞分化方向的細(xì)胞極性相關(guān)分子。
方法培養(yǎng)胚胎干細(xì)胞,分別收集0天,2天,4天,6天,8天,10天
2、,12天的細(xì)胞樣本,通過(guò)qRT-PCR來(lái)檢測(cè)細(xì)胞極性分子mRNA的表達(dá)。
結(jié)果:在胚胎發(fā)育過(guò)程中,細(xì)胞極性相關(guān)分子mRNA的表達(dá)呈現(xiàn)不同水平及變化趨勢(shì):
部分極性相關(guān)分子基因亞型在小鼠胚胎干細(xì)胞分化過(guò)程中不表達(dá)(如Par6b,crumb1,mpp3,mpp4,mpp6,dlg2,mark1,prox2,miranda);部分基因的表達(dá)在發(fā)育過(guò)程中顯著上調(diào),尤其是Par3B,Crumb2,crumb3,Dlg4及Pro
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