干細(xì)胞標(biāo)志物CD133、Nestin和CD44在惡性黑素瘤皮損中的表達(dá)及意義.pdf

1、干細(xì)胞是一類具有自我更新能力、無限增殖能力以及多向分化潛能的原始細(xì)胞。多項(xiàng)研究表明,骨髓、神經(jīng)系統(tǒng)及前列腺等組織中存在干細(xì)胞。腫瘤干細(xì)胞是腫瘤細(xì)胞中一小部分具有干細(xì)胞性質(zhì)的細(xì)胞群體,能夠無限自我更新,并具有多種分化潛能和高度增殖能力,可產(chǎn)生不同表型的腫瘤細(xì)胞,形成新的腫瘤。腫瘤干細(xì)胞在白血病以及乳腺癌、腦腫瘤、前列腺癌、卵巢癌等實(shí)體腫瘤中的存在已經(jīng)得到證實(shí)。惡性黑素瘤(malignant melanoma,MM)是一種高度惡性的黑素細(xì)胞

2、腫瘤,原發(fā)皮膚多見,占皮膚惡性腫瘤的第三位(6.8％~20％),但死亡率達(dá)皮膚惡性腫瘤總數(shù)的80％左右,其世界范圍內(nèi)的發(fā)病率和死亡率均呈逐年上升趨勢。傳統(tǒng)放化療及手術(shù)治療在現(xiàn)階段仍無法克服腫瘤復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移、化學(xué)耐藥及高死亡率等現(xiàn)實(shí)問題,其可能原因之一是MM中腫瘤干細(xì)胞的存在所致。但有關(guān)MM腫瘤干細(xì)胞的研究國內(nèi)尚無文獻(xiàn)報(bào)道,國外也僅有少數(shù)文獻(xiàn)報(bào)道。CD133是一種五次跨膜細(xì)胞表面糖蛋白分子,分子量120KD,其表達(dá)的特點(diǎn)是隨著細(xì)胞的分化迅速

3、下調(diào),這使得它成為一個鑒定和分離干細(xì)胞的特異分子標(biāo)志,其在骨髓、外周血造血干細(xì)胞和內(nèi)皮干細(xì)胞表達(dá),在成熟內(nèi)皮細(xì)胞不表達(dá)。CD133可促進(jìn)新生血管的生成及參與信號傳遞。研究發(fā)現(xiàn),CD133也表達(dá)于其他系統(tǒng)的干細(xì)胞,如神經(jīng)干細(xì)胞、胚胎干細(xì)胞、前列腺干細(xì)胞等,最近已證明它是腦腫瘤干細(xì)胞和前列腺腫瘤干細(xì)胞的標(biāo)志之一。Nestin是一種存在于神經(jīng)上皮干細(xì)胞的中間絲成分,在未分化的神經(jīng)多能干細(xì)胞中表達(dá),是神經(jīng)干細(xì)胞的一個標(biāo)記物,其在中樞神經(jīng)系統(tǒng)干細(xì)

4、胞、胰島干細(xì)胞及胃腸干細(xì)胞中也有表達(dá)。研究證實(shí)Nestin是腦腫瘤干細(xì)胞的表面標(biāo)志之一。CD44是一種細(xì)胞表面糖蛋白分子,是細(xì)胞黏附分子的成員之一,它廣泛表達(dá)于正常人的上皮細(xì)胞、間質(zhì)細(xì)胞及一些特定的腫瘤細(xì)胞表面,其在淋巴細(xì)胞歸巢、細(xì)胞與細(xì)胞間粘附、細(xì)胞與基質(zhì)間相互作用、免疫識別以及細(xì)胞的運(yùn)動中起促進(jìn)作用。有研究證實(shí)CD44與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)移、復(fù)發(fā)關(guān)系密切,已經(jīng)證實(shí)CD44為前列腺干細(xì)胞、卵巢癌腫瘤干細(xì)胞、乳腺癌腫瘤干細(xì)胞、前列腺癌

5、腫瘤干細(xì)胞和肺癌腫瘤干細(xì)胞的表面標(biāo)志之一。為探討干細(xì)胞表面標(biāo)志物在人MM組織、皮內(nèi)痣組織中的表達(dá)及意義,我們采用免疫組化方法對CD133、Nestin和CD44的蛋白表達(dá)進(jìn)行研究,旨在進(jìn)一步證實(shí)MM中存在腫瘤干細(xì)胞,并為黑素瘤干細(xì)胞的鑒定和分選提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　材料與方法:1.采用免疫組化SP法檢測CD133、Nestin和CD44在30例MM及30例皮內(nèi)痣皮損中的表達(dá)。2.統(tǒng)計(jì)學(xué)處理:數(shù)據(jù)用(?)±S表示,采用SPSS10.0

6、軟件包進(jìn)行數(shù)據(jù)分析,計(jì)數(shù)資料計(jì)算陽性表達(dá)率,兩組中CD133、Nestin和CD44陽性表達(dá)率的比較用計(jì)數(shù)資料的χ~2檢驗(yàn)(Chi-square);兩組中CD133、Nestin和CD44陽性細(xì)胞率平均值的比較用t檢驗(yàn);Pearson法計(jì)算相關(guān)系數(shù)。檢驗(yàn)水準(zhǔn)均為α=0.05。 結(jié)果:1.CD133的表達(dá)CD133在MM組、皮內(nèi)痣組中的陽性表達(dá)率分別為53.33％(16/30)和23.33％(7/30),MM組與皮內(nèi)痣組CD133的

7、陽性表達(dá)率比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ~2=5.711,P=0.017)。CD133在MM組、皮內(nèi)痣組中的陽性細(xì)胞率平均值分別為2.98％±5.62％和0.10％±0.21％,MM組與皮內(nèi)痣組CD133的陽性細(xì)胞率比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=2.801,P=0.007)。CD133在MM中陽性細(xì)胞形態(tài)不一,呈圓形、橢圓形、梭形或多角形,大小不一,大部分陽性細(xì)胞在組織中散在分布,部分呈條索狀或巢狀排列;在皮內(nèi)痣陽性細(xì)胞形態(tài)大小較為一致,呈圓形、橢圓形,

8、多在組織中散在分布。2.Nestin的表達(dá)Nestin在MM組、皮內(nèi)痣組中的陽性表達(dá)率分別為80.00％(24/30)和5333％(16/30),MM組與皮內(nèi)痣組Nestin的陽性表達(dá)率比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ~2=4.800,P=0.028)。Nestin在MM組、皮內(nèi)痣組中的陽性細(xì)胞率平均值分別為34.92％±34.89％和7.26％±13.13％,MM組與皮內(nèi)痣組Nestin的陽性細(xì)胞率比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=4.065,P=0.000

9、)。Nestin在MM中陽性細(xì)胞形態(tài)不一,呈圓形、橢圓形、梭形或多角形等,大小不一,大部分陽性細(xì)胞在組織中呈大的團(tuán)塊狀或巢狀分布,少量呈散在分布;在皮內(nèi)痣陽性細(xì)胞形態(tài)大小較為一致,呈圓形、橢圓形,多在組織中散在分布,部分呈小的巢狀分布。3.CD44的表達(dá)CD44在MM組、皮內(nèi)痣組中的陽性表達(dá)率分別為20.00％(6/30)和0(0/30),MM組與皮內(nèi)痣組CD44的陽性表達(dá)率比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ~2=6.667,P=0.010)。CD4

10、4在MM組、皮內(nèi)痣組中的陽性細(xì)胞率平均值分別為1.28％±3.26％和0,MM組與皮內(nèi)痣組CD44的陽性細(xì)胞率比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=2.153,P=0.037)。CD44在MM中陽性細(xì)胞形態(tài)不一,呈圓形、橢圓形、梭形、多角形等,大小不一,大部分陽性細(xì)胞在組織中散在分布,分布不均,偶有局灶性群聚分布現(xiàn)象;在皮內(nèi)痣中呈陰性表達(dá)。4.CD133、Nestin和CD44在兩組中陽性細(xì)胞率與患者性別、年齡、病程比較,差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均>0.