骨橋蛋白下調(diào)對(duì)乳腺癌細(xì)胞生物學(xué)行為及MMP-2表達(dá)的影響.pdf

1、目的:高表達(dá)的骨橋蛋白(osteopontin，OPN)被認(rèn)為影響乳腺癌的發(fā)生和發(fā)展，提示OPN可作為乳腺癌治療的靶點(diǎn)。本研究是要觀察OPN下調(diào)對(duì)乳腺癌MDA-MB-231細(xì)胞生物學(xué)行為及基質(zhì)金屬蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2，MMP-2)表達(dá)的影響。 方法:采用重組的OPN mRNA干擾質(zhì)粒轉(zhuǎn)染MDA-MB-231細(xì)胞，建立穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞株。RT-PCR和Western blot檢測(cè)細(xì)胞中OPN

2、和MMP-2的表達(dá)，MTT法、流式細(xì)胞儀檢測(cè)和軟瓊脂生長(zhǎng)實(shí)驗(yàn)觀察OPN下調(diào)對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)、細(xì)胞周期分布和瘤細(xì)胞惡性表型的影響，ELISA檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)液中MMP-2的分泌水平。 結(jié)果:與MDA-MB-231細(xì)胞相比，建立的轉(zhuǎn)染細(xì)胞株M-OPN S1和M-OPN S2的OPN mRNA表達(dá)分別下降53％和61％，OPN蛋白表達(dá)分別下調(diào)56％和73％；MMP-2 mRNA表達(dá)分別下降55％和70％，MMP-2蛋白表達(dá)分別下降54％和62％