絞股藍(lán)皂苷對谷氨酸所致大鼠海馬組織損傷的保護(hù)作用.pdf

1、目的：谷氨酸(glutamate，Glu)是中樞神經(jīng)系統(tǒng)中一種重要的興奮性神經(jīng)遞質(zhì)，參與許多神經(jīng)功能活動，不僅具有營養(yǎng)神經(jīng)，促使神經(jīng)元生長發(fā)育及軸突生長等重要生理作用，同時也是一種神經(jīng)毒素，由于谷氨酸過度增加而引起的神經(jīng)毒性可導(dǎo)致腦組織損傷。一方面，谷氨酸的興奮性神經(jīng)毒性作用是導(dǎo)致神經(jīng)細(xì)胞損傷的重要機(jī)制，許多因素參與了這個過程，已知氧自由基發(fā)揮著特別重要的作用；另一方面，谷氨酸還可通過抑制細(xì)胞膜上谷氫酸/胱氨酸逆轉(zhuǎn)運(yùn)子的作用導(dǎo)致氧化性神

2、經(jīng)毒性。缺血、腦卒中等急性神經(jīng)損傷及阿爾茨海默病(Alzheimer'sdisease，AD)、帕金森病(Parkinson's disease，PD)等慢性神經(jīng)退行性疾病都與谷氨酸的神經(jīng)毒性密切相關(guān)。 絞股藍(lán)(Gynostemma pentaphy11um(Thunb)Makino)為葫蘆科絞股藍(lán)屬多年生草質(zhì)藤本植物，其主要有效成分為絞股藍(lán)總皂苷(gypenosides，GP)。近20年來，相關(guān)的研究證實(shí)GP具有多種藥理活性，

3、包括抗癌、抗衰老、免疫調(diào)節(jié)、降血脂以及顯著的抗氧化作用等，但有關(guān)GP對中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷保護(hù)作用的研究極少。辛華教授等應(yīng)用體外培養(yǎng)的胎鼠大腦皮層神經(jīng)細(xì)胞，建立谷氨酸損傷模型和GP保護(hù)模型，從細(xì)胞和分子水平對GP的神經(jīng)保護(hù)作用及其機(jī)制進(jìn)行了大量研究，證實(shí)GP可以拮抗谷氨酸誘導(dǎo)的神經(jīng)細(xì)胞損傷。本研究以側(cè)腦室注射谷氨酸造成大鼠海馬組織損傷，從整體水平研究GP對谷氨酸誘導(dǎo)的神經(jīng)損傷的保護(hù)作用及其機(jī)制，為GP用于防治谷氨酸大量釋放造成的神經(jīng)損傷和中

4、樞神經(jīng)退行性疾病提供實(shí)驗依據(jù)。 方法：Wistar大鼠100只，隨機(jī)分為假手術(shù)組、谷氨酸損傷組、GP低(200mg/kg)、中(400mg/kg)和高(800mg/kg)劑量組。GP組預(yù)先灌胃給藥10d。大鼠經(jīng)側(cè)腦室注射谷氨酸后2h取腦，測定各組大鼠海馬組織勻漿中的丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)活性及產(chǎn)生羥自由基的能力；制備海馬組織切片，HE染色，觀察各組病理形態(tài)學(xué)變化；采用免

5、疫組織化學(xué)方法檢測α-氨基-3-梭基-5-甲基惡唑-4-丙酸(AMPA)受體亞單位GluR2蛋白表達(dá)：RT-PCR法檢測AMPA受體亞單位GluR2mRNA表達(dá)水平。 結(jié)果：谷氨酸損傷組大鼠海馬組織中MDA含量和羥自由基生成能力均顯著高于假手術(shù)組(P<0.05)，而SOD和GSH-PX活性降低(P<0.05)；與谷氨酸損傷組比較，GP組MDA含量和產(chǎn)生羥自由基的能力顯著降低(P<0.01),SOD和GSH-PX活性明顯增強(qiáng)(P<

6、0.01)；海馬組織切片HE染色顯示，GP組神經(jīng)元變性及壞死較谷氨酸損傷組明顯減少；免疫組化結(jié)果顯示，與假手術(shù)組比較，谷氨酸損傷組AMPA受體亞單位GluR2蛋白mRNA表達(dá)水平明顯下調(diào)，GP組表達(dá)水平則顯著增高。顯微圖像及統(tǒng)計分析結(jié)果表明：與假手術(shù)組相比，谷氨酸損傷組大鼠海馬組織GluR2陽性神經(jīng)元平均光密度值降低(P<0.01)；RT-PCR法檢測結(jié)果表明，谷氨酸損傷組GluR2mRNA表達(dá)水平下調(diào)，GP組表達(dá)水平則明顯增高。綜合實(shí)