PJ34對(duì)谷氨酸誘導(dǎo)的HT-22細(xì)胞損傷保護(hù)作用的研究.pdf

1、目的: 探討谷氨酸（glutamate, Glu）誘導(dǎo)小鼠海馬系HT-22 細(xì)胞產(chǎn)生的神經(jīng)興奮性毒性作用，以及多聚ADP 核糖聚合酶[Poly(ADP-ribose)polymerase,PARP]抑制劑PJ34[N-(6-oxo-5，6-dihydrophenanthlidin-2-yl) -N，N-dimethylaeetamide·HCI]對(duì)谷氨酸誘導(dǎo)的神經(jīng)毒性的保護(hù)作用及其機(jī)制，并為研發(fā)有效的神經(jīng)系統(tǒng)疾病治療藥物提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)，也

2、為PJ34 在缺血性腦血管病的臨床應(yīng)用方面提供了借鑒。
　　 方法: 將培養(yǎng)后的HT-22 細(xì)胞分為Glu 組、PJ34 組、對(duì)照組、空白組4 組。
　　 Glu 組、PJ34 組分別用5 mmol/L Glu 誘導(dǎo)處理HT-22 細(xì)胞，構(gòu)建神經(jīng)細(xì)胞的損傷模型，PJ34 組隨后給予50μmol/L PARP 的特效抑制劑PJ34 進(jìn)行保護(hù)處理。繼續(xù)培養(yǎng)12、24 和48h 后，分別采用MTT 法檢測(cè)各組的細(xì)胞活力和細(xì)胞抑

3、制率；透射電鏡觀察各組細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)變化；PAR 免疫熒光染色和Western Blot 方法觀察PARP 活性改變，Western Blot 方法檢測(cè)AIF 的核轉(zhuǎn)位情況。
　　 結(jié)果:
　　 1、MTT 法檢測(cè)Glu 組培養(yǎng)12 h 后HT-22 細(xì)胞抑制率較對(duì)照組明顯升高，PJ34+Glu 組較Glu 組明顯下降；PJ34+Glu 組細(xì)胞活力較Glu 組顯著增高（P<0.05）
　　 2、透射電鏡觀察結(jié)果表明

4、：Glu 組細(xì)胞培養(yǎng)12h 后核膜形態(tài)發(fā)生改變，核固縮，空泡樣疏松化，粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)囊泡和線粒體腫脹；PJ34+ Glu 組各時(shí)間點(diǎn)細(xì)胞形態(tài)基本完整，核膜無增厚，線粒體有稍許腫脹和擴(kuò)張，有時(shí)可見胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)空泡；
　　 3、Glu 組培養(yǎng)12 h PAR 熒光亮度明顯強(qiáng)于對(duì)照組和PJ34+Glu 組；4、WesternBlot 法檢測(cè)示：Glu 組各時(shí)間點(diǎn)PARP 活性較對(duì)照組和PJ34+Glu 組均顯著增高（P<0.05），Glu