亞低溫預處理對谷氨酸誘導原代鼠皮質神經細胞損傷的保護作用.pdf

1、目的：觀察亞低溫預處理對體外培養(yǎng)鼠大腦皮質細胞類缺血-再灌注損傷的保護作用；探討亞低溫保護作用與亞低溫聯(lián)合藥物預處理保護作用相比較。
　　方法：取生后24h之內的新生SD乳鼠的腦皮質細胞，體外培養(yǎng)至第三天，用含2.5ug/ml阿糖胞苷培養(yǎng)基換液一次,抑制神經膠質細胞及纖維細胞生長，培養(yǎng)至第七天隨機分為五組：A組（實驗對照組），B組（谷氨酸損傷組），C組（亞低溫預處理組），D組（亞低溫聯(lián)合依達拉奉預處理組），E組（亞低溫聯(lián)合丙泊酚預

2、處理組）。C、D和E組分別予以亞低溫、亞低溫聯(lián)合依達拉奉和亞低溫聯(lián)合丙泊酚預處理。24h后B、C、D和E組予以200μmol/L谷氨酸損傷0.5h，所有分組換正常培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)24h后觀察指標。觀察指標為HE染色后顯微鏡下細胞形態(tài)變化和透視電鏡下細胞器的改變、細胞凋亡率、細胞存活率（MTT法）、乳酸脫氫酶（LDH）漏出率、c-fos蛋白。
　　結果：1. HE染色后正置顯微鏡下細胞形態(tài)變化:A組大部分細胞形態(tài)基本正常，胞漿呈淡紅色

3、，核呈藍色；極少數細胞胞漿呈深紅色，核呈藍黑色，核固縮。B組可見較多細胞胞漿呈深紅色，核呈藍黑色，核固縮，軸突皺縮明顯，有的突起斷裂,細胞數量明顯減少。C、D和E組，均細胞數量減少不明顯，細胞基本聯(lián)成網狀；可見少量細胞胞漿呈深紅色，核呈藍黑色，核固縮，呈凋亡狀態(tài)。2.透射電鏡下細胞超微結構的改變：A組神經細胞膜完整，線粒體和粗面內質網結構完好；B組細胞漿內細胞器數量明顯減少，線粒體出現(xiàn)嚴重腫脹、嵴消失，呈空泡樣或固縮,粗面內質網嚴重擴張

4、，核膜局部可見囊樣改變、溶解、斷裂，染色質濃縮、邊聚；C、D和E組病理改變較B組明顯減輕。3.細胞凋亡率、細胞存活率（MTT法）、乳酸脫氫酶（LDH）漏出率、c-fos蛋白結果類似：各預處理組與B組比較，差異有非常顯著性（P均＜0.01）；C組與D組比較，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；C組與E組比較，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。
　　結論：亞低溫預處理對離體大腦皮層神經細胞的谷氨酸損傷有保護作用。亞低溫聯(lián)合丙泊酚預處理組