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1、目的:利用蛋白質(zhì)組研究技術(shù),通過(guò)雙向電泳分離、比較大腸癌原發(fā)灶、正常大腸粘膜、大腸癌肝轉(zhuǎn)移灶中蛋白質(zhì)表達(dá)差異,通過(guò)質(zhì)譜檢測(cè)分析,確定與大腸癌肝轉(zhuǎn)移相關(guān)的蛋白質(zhì)組分.探討大腸癌肝轉(zhuǎn)移的分子機(jī)制,尋找和鑒定大腸癌肝轉(zhuǎn)移相關(guān)蛋白,為臨床預(yù)測(cè)和早期診斷大腸癌肝轉(zhuǎn)移提供依據(jù).結(jié)論:(1)建立的分步提取法可以提高組織蛋白質(zhì)組的提取率,減少常規(guī)一步提取法蛋白質(zhì)的丟失,提高了分離效果,對(duì)蛋白質(zhì)斑點(diǎn)的鑒別可提供更多的信息.(2)應(yīng)用固定pH梯度(IPG)
2、及膠內(nèi)重泡脹技術(shù),可提高雙向電泳的分辨率和重復(fù)性.(3)對(duì)比大腸癌原發(fā)灶、肝轉(zhuǎn)移灶、正常腸粘膜的雙向電泳圖象分析結(jié)果,表明在大腸癌發(fā)生和肝轉(zhuǎn)移的過(guò)程中有顯著的蛋白質(zhì)表達(dá)差異.(4)鈣調(diào)蛋白聯(lián)合體、核糖核酸酶—6—前體蛋白、α-甘露糖苷酶I表達(dá)缺失與大腸癌發(fā)生和肝轉(zhuǎn)移有關(guān);前阿樸脂蛋白增強(qiáng)表達(dá)與大腸癌發(fā)生和轉(zhuǎn)移有關(guān);Cdc42蛋白、β-珠蛋白、表達(dá)與肝轉(zhuǎn)移有關(guān).(5)C-4、M-7、M-9蛋白可能是與大腸癌發(fā)生和肝轉(zhuǎn)移相關(guān)的新蛋白,其序列
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