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文檔簡(jiǎn)介
1、百合無(wú)癥病毒(LSV)是導(dǎo)致百合種球退化的主要病毒,給百合種植業(yè)帶來(lái)嚴(yán)重的危害,目前根治該病毒已成為科學(xué)工作者急待解決的課題。
本研究從分離提純?nèi)静“俸现仓曛蠰SV入手,用該病毒侵染百合無(wú)毒苗,通過(guò)檢測(cè)受LSV侵染后寄主植物的生理生化指標(biāo)的變化和電鏡觀察感病寄主細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)病變來(lái)闡明該病毒的致病機(jī)理,為百合的抗病性育種提供依據(jù)。
以東方百合‘西伯利亞’和‘索邦’感病植株為試材,通過(guò)二次PEG沉淀法和蔗糖密度梯度提純法
2、對(duì)LSV進(jìn)行分離提純。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:蔗糖密度梯度提純法對(duì)LSV的提純效果較好,得到完整且數(shù)量多的LSV粒子,病毒的紫外吸收高峰為270 nm,OD=1.714,最低吸收峰為240 nm,OD=0.921,OD260與OD280的比值為1.323。病毒濃度為0.328 mg/mL,產(chǎn)量為1.453 mg/100g。
LSV分別侵染西伯利亞和索邦,通過(guò)測(cè)定葉綠素含量、光合速率以及SOD、POD、PPO以及PAL活性,明確該病毒侵染
3、百合生理生化變化規(guī)律。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:LSV侵染百合后,葉綠素a,葉綠素b和總?cè)~綠素含量與健康對(duì)照植株相比有不同程度的減少,西伯利亞分別是28.6%、33.3%和23.5%,索邦分別是10%、12.5%和11.7%。百合的Pn、Gs和Ci受LSV侵染后,相較于健康對(duì)照都降低,西伯利亞分別降低33.3%、25%和13.8%,索邦分別降低15.3%、18.5%和7.1%??寡趸赶到y(tǒng)呈現(xiàn)規(guī)律性反應(yīng),即SOD活性比健康對(duì)照明顯上升,西伯利亞和索
4、邦分別增加了23.3%和11.7%;西伯利亞POD活性比健康對(duì)照增長(zhǎng)了29.4%,索邦增長(zhǎng)了10.3%; PPO活性在接種前期比對(duì)照分別增長(zhǎng)了16.7%和9.2%; PAL活性高峰值比健康對(duì)照分別增長(zhǎng)了42.5%和26.6%,表現(xiàn)為原有正常代謝發(fā)生紊亂,次生代謝系統(tǒng)作用增強(qiáng)。
透射電鏡觀察感染LSV和LMoV的寄主細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu),結(jié)果顯示:在LSV侵染的植株中,葉綠體的病變表現(xiàn)為:幾乎所有葉綠體片層結(jié)構(gòu)發(fā)育受阻,片層結(jié)構(gòu)疏松且
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