油茶品種遺傳多樣性及親緣關(guān)系的研究.pdf

1、油茶是我國特有的木本食用油料樹種，本研究以油茶總DNA為材料，進行了SSRs、AFLPs和ISSRs分子標(biāo)記的研究。
　　 采用正交試驗和單因素試驗，建立并優(yōu)化了油茶SSRPCR反應(yīng)體系，并篩選出對適合油茶SSR分析的引物組合，結(jié)果表明，油茶最適SSRPCR反應(yīng)體系為模板DNA(510ng/μL)1.0μL，Mg2+(25mmol/L)0.7μL，dNTP(10 mmol/L)0.15μL，正反向引物均為(10μmol/L)0.

2、2μL，TaqDNA聚合酶(5U/μL)0.1μL，10×PCRbuffer1.0μL，HPLCH2O6.65μL，總體積10.0μL；同時證明了微衛(wèi)星位點在山茶屬 (CamelliaL.)植物的種間通用性。
　　 AFLP反應(yīng)體系包括酶切和連接體系、預(yù)擴增和選擇性擴增的建立與優(yōu)化，并篩選出8對(EACT/MAAC，EACG/MCAA，EAAG/MCGA，EAGT/MAGT，EAGG/MAAG，EAGG/MAGT，EATC/MA

3、GT，EAAT/MCAA)適合油茶AFLP分析的引物組合，且經(jīng)重復(fù)驗證，條帶清晰，多態(tài)性高。
　　 利用ISSR分子標(biāo)記技術(shù)對油茶品種遺傳多樣和親緣關(guān)系進行了研究，結(jié)果表明其遺傳多樣性較高，遺傳多樣性參數(shù)分別為多態(tài)性位點百分率(PPL)99.25％，期望雜合度(He)0.23，遺傳多樣性指數(shù)(I)0.37，普通油茶品種的遺傳多樣性參數(shù)為PPL為96.24％，He為0.23，I為0.37。用UPGMA 聚類分析法構(gòu)建了樹形圖，表明