MDRV與H9AIV協(xié)同感染對番鴨細(xì)胞免疫機(jī)能的影響.pdf

1、番鴨呼腸孤病毒病是1997年以來我國新出現(xiàn)的高發(fā)病高死亡的番鴨疫病，危害極大。為探討番鴨呼腸孤病毒(MDRV)和H9亞型水禽流感病毒(H9AIV)單一感染和協(xié)同感染對番鴨細(xì)胞免疫功能的影響，本試驗(yàn)以MDRV和H9AIV為材料，人工感染8日齡健康雛番鴨，于感染后不同時(shí)間取樣進(jìn)行如下研究：
　　 (1)應(yīng)用MTT法測定感染后 1d、3d、5d、7d、10d和14d 番鴨血液、胸腺和脾臟中T淋巴細(xì)胞刺激指數(shù)，分析MDRV和H9AIV感

2、染對番鴨T淋巴細(xì)胞增殖功能的影響。結(jié)果顯示8日齡番鴨人工感染后，單一感染組和共感染組番鴨血液、胸腺和脾臟的T淋巴細(xì)胞刺激指數(shù)均明顯低于健康對照組，其中共感染組又低于單一感染組。表明H9AIV和MDRV能抑制番鴨外周血液及免疫器官(胸腺、脾臟)中T淋巴細(xì)胞增殖功能，MDRV與H9 AIV協(xié)同感染進(jìn)一步加重細(xì)胞免疫抑制程度。
　　 (2)應(yīng)用流式細(xì)胞儀測定感染后1d、4d、7d、11d、14d、21d和30d番鴨血液T淋巴細(xì)胞比率，

3、分析MDRV和H9AIV感染對番鴨血液T淋巴細(xì)胞數(shù)量的影響。結(jié)果顯示：單一感染組和共感染組番鴨血液T淋巴細(xì)胞比率均低于健康對照組(差異顯著)，PI21d時(shí)各感染組T細(xì)胞比率逐漸上升，PI30d時(shí)單一感染組與對照組差異不顯著，而共感染與對照組差異顯著。表明MDRV與H9 AIV均能導(dǎo)致番鴨血液中T淋巴細(xì)胞數(shù)量降低，協(xié)同感染更為明顯。
　　 (3)觀察試驗(yàn)番鴨發(fā)病死亡和免疫器官發(fā)育情況，測定感染后7d和14d試驗(yàn)鴨的免疫器官指數(shù)。結(jié)

4、果顯示：共感染組的發(fā)病率和死亡率均明顯高于單一感染組；MDRV組和共感染組番鴨的胸腺和法氏囊萎縮，胸腺和法氏囊器官指數(shù)均降低，但脾臟腫大壞死，脾臟指數(shù)較對照組和AIV組升高。表明H9 AIV感染不影響番鴨的生長發(fā)育和免疫器官指數(shù)，MDRV單一感染或與H9 AIV協(xié)同感染增加番鴨發(fā)病率和死亡率，并加重病情。
　　 (4)應(yīng)用淋巴細(xì)胞分離液分離淋巴細(xì)胞，按常規(guī)白細(xì)胞計(jì)數(shù)法測定感染后7d和14d番鴨血液、脾臟和胸腺中淋巴單核類細(xì)胞數(shù)量

5、，結(jié)果顯示：MDRV組與共感染組番鴨血液、脾臟和胸腺中的淋巴單核類細(xì)胞數(shù)量均低于對照組和AIV組，差異極顯著；而AIV組與對照組差異不顯著。表明H9AIV對番鴨血液、脾臟和胸腺中的淋巴單核類細(xì)胞數(shù)量影響較??；MDRV能導(dǎo)致番鴨淋巴單核類細(xì)胞數(shù)量明顯降低；兩者共感染能使感染鴨淋巴單核類細(xì)胞數(shù)量進(jìn)一步下降。
　　 (5)應(yīng)用MTT法測定感染后1d、7d、14d、21d和28d番鴨血液中細(xì)胞毒性T細(xì)胞對靶細(xì)胞(SP2/0骨髓瘤細(xì)胞)的

6、殺傷比率，分析MDRV和H9AIV感染對番鴨CTL細(xì)胞殺傷功能的影響。結(jié)果顯示：8日齡番鴨人工感染后，AIV組CTL細(xì)胞殺傷活性與對照組差異不顯著，MDRV組CTL細(xì)胞殺傷活性于PI 14d與對照組相比差異顯著，其余差異均不顯著；共感染組在PI7d～28d感染鴨血液CTL細(xì)胞殺傷活性均低于對照組，差異顯著。表明H9 AIV感染基本不影響番鴨血液CTL細(xì)胞的殺傷活性，MDRV感染對CTL細(xì)胞殺傷活性有一定的抑制作用，MDRV和H9 AIV

7、協(xié)同感染對CTL細(xì)胞殺傷活性有明顯的抑制作用。
　　 綜上所述，8日齡雛番鴨感染H9 AIV后其生長發(fā)育、免疫器官指數(shù)、淋巴單核類細(xì)胞數(shù)量和CTL細(xì)胞殺傷活性基本不受影響，但H9 AIV感染能不同程度降低血液T細(xì)胞數(shù)量和增殖能力。MDRV感染不僅導(dǎo)致番鴨發(fā)病死亡，且免疫器官嚴(yán)重受損，番鴨血液和免疫器官中淋巴單核類細(xì)胞數(shù)量、CTL細(xì)胞殺傷活性、T細(xì)胞比率和T細(xì)胞增殖功能顯著下降。MDRV和H9 AIV協(xié)同感染具有不同程度的疊加效應(yīng)