甘藍型油菜(brassicanapusl.)高頻再生體系及遺傳轉(zhuǎn)化體系建立研究

1、西南農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文甘藍型油菜(Brassica napus L.)高頻再生體系及遺傳轉(zhuǎn)化體系建立研究姓名：金治平申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：植物學(xué)指導(dǎo)教師：李名揚;裴炎20000501H i g h f r e q u e n c y r e g e n e r a t i o no f r a p e s e e d ( B r a s s i c a n a p u s L ．) a n dg e n e t i ct r a n

2、 s f o r m a t i o n m e d i a t e d b y A g r o b a c t e r i u m t u m e f a c i e n sC a n d i d a t e ： J i n Z h i p i n gT u t o r ：P m f ．L i M i n g y a n gP r o f ．P e i Y a I l( B i o t e c h n o l o g y - r e

3、s e a r c h c e n t e r ，S W A U ，C h o n g q i n g ，C h i n a )A b s t r a e tR a p e s e e d ( B r a s s i c an a p u s 上．) i sa l l i m p o r t a n to i l s e e dc r o pw o r l d w i d e ．H o w e v e r ，t h ec r o ph

4、a ss u f f e r e df r o mv a r i o u sd i s e a s e s ，e s p e c i a l l yt h e S c l e r o t i n i as c l e r o t i o r u m( L i b ．) d eB a r y ，f o ral o n gt i m e ．T h e r ea r e f e we f f i e t i v em e 踟e st o c

5、o n t r o lt h ed i s e a s eu pt on o w ．T h ep l a n tt r a n s g e n i ce n g i n e e r i n g i s e m p l o y e da s ap o w e r f u lw e a p o n t oc o n _ l x o lt h ed e s e a s e ．S e v e r a ls u c c e s s e sh a

6、v eb e e nr e p o r t e dr e c e n t l y ．T h i sr e s e a r c hi s a i m e da t c r e a t i n gs o m en e wm a t e r i a l sr e s i s t i n gt o t h eS s c l e r o t i o r u m( L i b ．) f o rb r e e d i n gb yi n t r o

7、d u c i n ga na n t i f u n g a lp e p t i d eg e n et ot h ec r o p ．H e r ea r et h e r e s u l t s ：1 ．D e v e l o p m e n to f h i g hf r e q u e n c yr e g e n e r a t i o ns y s t e m sb a s e do nt h e c o t y l e

8、 d o n sa n d h y p o c o t y l sC o t y l e d o n sa n dh y p o c o t y l sw e r ee m p l o y e d a se x p l a n t si nt h ee x p e r i m e n t ．T h ec o t y l e d o m w e r e e x c i s e d f r o m 5 d - o l d s e e d i

9、 n g s i n c l u d i n g l ～2 m m p e t i o l e ，T h eh y p o e o t y l sw e r ef r o m 7 d - o l ds e e d i n g sc u ti n t o0 ．5 ～1 ．0 e mi nl e n g t h ．T h ec o t y l e d o n sa n dh y p o c o t y l sw e r eb o t hp

10、r e - c u l t u r e do nM S I ( M S 0 + I ．0 r a g ／1 2 ，4 - D + 0 ．2 m 9 0 B A )f o r 4 d ．S u b s e q u e n t l y ，t h ec o t y l e d o n sw e r e s u b - c u l t u r e d o n M S 2 ( M S 0 + 4 ．5 m g ／l B A +4 m 鯽A g N

11、 0 3 ) w h i l e t h eh y p o c o t y l so nM S 3 ( M S 0 + 2 ．5 m g a B A + 0 ．1 m g a N A h + 6m g ／l A g N 0 3 ) ．S h o o t so c c u r r e di nc o t y l e d o n sa f t e r2 5 dc u l t u r ew h i l eo c c u r r e d i n

12、h y p o c o t y l s5 0 dl a t e r ．T e n 丑n a p u sc u l t i v a r sw e r eu s e di nt h ee x p e r i m e n t ．S h o o tr e g e n e r a t i o no c c u r r e di nt h ec o t y l e d o n a r yp e t i o l eo f e i g h tc u l

13、 t i v a r sw i t hm o r e t h a n9 0 ％o f t h e e x p l a n t s y i e l d i n gs h o o t sw h i l e t h eo t h e r t w o o n l y3 5 ．4 ％．M o r et h a n9 0 ％o fh y p o e o t y le x p l a n t so f t o wc u l t i v a r se

14、m e r g e ds h o o t sw h i l em o r et h a n8 0 ％o fh y p o c o t y le x p l a n t so f 6c u l t i v a r sr e g e n e r a t e d ．T h er e g e n e r a t i o nf r e q u e n c i e so ft h eo t h e rt w o w e r e l e s st h