蛋內(nèi)注射瘦素對出雛后肉雞肝臟膽固醇代謝的影響.pdf

1、本實驗室以往的研究結(jié)果提示母雞可通過調(diào)節(jié)瘦素在蛋內(nèi)的沉積，程序化地影響后代出雛后的生長與代謝。蛋內(nèi)注射leptin影響出雛后肉雞的生長，并伴隨血液脂肪酸代謝相關(guān)生化指標的變化。本研究旨在探討蛋內(nèi)注射leptin對出雛后肉雞肝臟膽固醇代謝的影響及其可能的作用途徑。
　　
　　 1蛋內(nèi)注射瘦素對肉雞血清、肝臟膽固醇代謝相關(guān)生化指標的影響
　　 挑選蛋重相近的三黃肉雞種蛋，隨機分為三組：對照組（control）在蛋清

2、內(nèi)注射100μL溶劑（phosphate buffered saline，PBS），leptin處理組分別注射0.5μg/100μLPBS（低劑量組，Lleptin）和5.0μg/100μLPBS（高劑量組，Hleptin）的重組小鼠leptin,出雛后飼養(yǎng)至21日齡時采取肝臟和血清樣品。用生化分析法測定肝臟及血清總膽固醇(total cholesterol, Tch)，血清高密度脂蛋白膽固醇(high density lipoprot

3、eincholesterol,HDL-C)和低密度月旨蛋白膽固醇（low density lipoprotein cholesterol,LDL-C）含量。結(jié)果表明：Hleptin組肉雞21日齡肝臟Tch和血清中Tch、HDL-C和LDL-C的含量均極顯著升高(P＜0.05)，并且主要表現(xiàn)在雄性(P＜0.05)，雌性上述各指標與對照組相比無顯著差異，但LDL-C/HDL-C比值極顯著升高(P＝0.00)。所有檢測的指標在低劑量組均未顯示

4、顯著的變化。以上結(jié)果提示：蛋內(nèi)注射leptin影響出雛后肉雞膽固醇代謝，并存在劑量和性別依賴性。
　　 2蛋內(nèi)注射瘦素對肉雞肝臟膽固醇代謝相關(guān)因子表達的影響
　　 為探討蛋內(nèi)注射leptin是否通過影響肝臟膽固醇代謝相關(guān)因子表達而影響出雛后肉雞膽固醇代謝，我們用實時熒光RT-PCR定量檢測肝臟3-羥-3-甲基戊二酸單酰CoA還原酶（3-Hydroxy-3-methylglutaryl coenzyme A reducta

5、se,HMGR）、膽固醇7α-羥化酶(cholesterol-7alpha-hydroxylase，CYP7A1)、低密度脂蛋白受體（low density lipoproteinreceptor,LDLR）和固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白（sterol regulator element-binding protein2,SREBP-2）mRNA，并用Westernblot方法測定肝臟SREBP-2的蛋白含量。結(jié)果表明：Hleptin組和Lle

6、ptin組雌性肉雞肝臟的HMGR和CYP7A1 mRNA水平均顯著低于對照組（P＜0.05）；蛋內(nèi)注射高劑量和低劑量的leptin均能顯著降低21日齡肉雞肝臟SREBP-2mRNA表達（P＜0.05），并不表現(xiàn)明顯的性別差異；但肝臟中SREBP-2蛋白含量的變化與mRNA并不吻合，高劑量組肝臟SREBP-2蛋白含量有增加趨勢(P=0.078)，其中雄性與對照組相比極顯著增加(P=0.009)，而低劑量組肝臟中SREBP-2的蛋白含量無變

7、化。以上結(jié)果表明：蛋內(nèi)注射leptin可影響肉雞出雛后快速生長期肝臟膽固醇代謝相關(guān)基因的表達。高劑量組雄性肉雞肝臟中較高的SREBP-2蛋白含量與其肝臟和血清中高膽固醇水平相吻合。但轉(zhuǎn)錄水平的變化正好相反，leptin處理組肉雞肝臟SREBP-2和HMGR轉(zhuǎn)錄均表現(xiàn)下調(diào)，這可能與膽固醇的反饋調(diào)節(jié)有關(guān)，也說明SREBP-2的轉(zhuǎn)錄和翻譯存在不同的調(diào)節(jié)機制。此外，蛋內(nèi)注射Leptin對肉雞肝臟膽固醇合成和轉(zhuǎn)化相關(guān)基因的調(diào)節(jié)也存在劑量和性別依賴