慢病毒介導(dǎo)的GTPBP4基因沉默對人肝癌細(xì)胞侵襲遷移能力的影響.pdf

1、分類號：密級：UDC：學(xué)號：416522613555南昌大學(xué)專業(yè)學(xué)位碩士研究生學(xué)位論文慢病毒介導(dǎo)的慢病毒介導(dǎo)的GTPBP4基因沉默對人肝癌細(xì)胞侵襲基因沉默對人肝癌細(xì)胞侵襲遷移能力的影響遷移能力的影響TheeffectsofsilenceofGTPBP4bylentivirusoninvasionmetastasisofhumanhepatocarcinomacell鄭燕培養(yǎng)單位（院、系）：南昌大學(xué)醫(yī)學(xué)院指導(dǎo)教師姓名、職稱：張吉翔教授申請

2、學(xué)位的學(xué)科門類：醫(yī)學(xué)學(xué)科專業(yè)名稱：消化內(nèi)科論文答辯日期：2016年5月答辯委員會主席：評閱人：2016年5月摘要II摘要目的目的：本實(shí)驗組前期基因芯片篩查提示，GTPBP4在肝癌組織中呈現(xiàn)高表達(dá)。本研究旨在運(yùn)用慢病毒載體介導(dǎo)的RNAi技術(shù)，使GTPBP4基因達(dá)到沉默的效果，進(jìn)一步觀察GTPBP4對肝癌細(xì)胞侵襲及遷移能力造成的影響。方法方法：1、選取人肝癌SMMC7721細(xì)胞和MHCC97H細(xì)胞，利用qRTPCR和WesternBlot法

3、在mRNA水平和蛋白水平篩選出最有效GTPBP4RNAi慢病毒載體，以用作后續(xù)實(shí)驗，并檢測在這兩種肝癌細(xì)胞中GTPBP4基因沉默的效果；2、用篩選出的最有效GTPBP4RNAi慢病毒載體感染人肝癌SMMC7721細(xì)胞和MHCC97H細(xì)胞后，分別用Transwell侵襲實(shí)驗和細(xì)胞劃痕實(shí)驗檢測GTPBP4基因沉默后對肝癌細(xì)胞侵襲能力及遷移能力造成的影響。實(shí)驗分為3組：正常組、陰性對照組（NC組）、實(shí)驗組（最有效慢病毒感染組）。3、Weste

4、rnBlot檢測GTPBP4基因沉默后MMP9的蛋白表達(dá)的變化。結(jié)果：結(jié)果：1、通過qRTPCR和WesternBlot法檢測，1、2、3號慢病毒在人肝癌SMMC7721細(xì)胞及MHCC97H細(xì)胞中，都能使GTPBP4達(dá)到基因沉默的效果（p0.05）。3、和相對應(yīng)的正常組及陰性對照組進(jìn)行比較，感染GTPBP4RNAi慢病毒組（實(shí)驗組）人肝癌SMMC7721細(xì)胞和MHCC97H細(xì)胞的遷移能力均受到抑制（p0.05）。4、GTPBP4基因沉默