體外誘導(dǎo)兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向上皮細(xì)胞分化的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:探討在體外誘導(dǎo)兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（Bone Marrow Mesenehymal Stem Cells，BMSCs）向上皮細(xì)胞分化的的有效方法。 方法:第一步：自免陰道中提取其上皮細(xì)胞，體外培養(yǎng)并擴(kuò)增，且觀察其形態(tài)并鑒定。第二步：自兔髂骨抽取骨髓液，采用密度梯度離心法+貼壁培養(yǎng)法分離和提純骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞，體外培養(yǎng)擴(kuò)增，觀察其形態(tài)學(xué)變化并鑒定。第三步：采用表皮生長(zhǎng)因子（Epidermal growth factor，EGF

2、）和上皮細(xì)胞共培養(yǎng)誘導(dǎo)法，與上皮細(xì)胞共培養(yǎng)誘導(dǎo)等方法誘導(dǎo)其向上皮細(xì)胞分化，通過形態(tài)學(xué)觀察及免疫組化方法比較各種誘導(dǎo)方法的誘導(dǎo)效率。 結(jié)果:本實(shí)驗(yàn)獲得的兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞增殖速度快，細(xì)胞純度高。在各組誘導(dǎo)實(shí)驗(yàn)中，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，SNK-q檢驗(yàn)比較，以表皮生長(zhǎng)因子+共培養(yǎng)聯(lián)合誘導(dǎo)組效率最高，單純共培養(yǎng)誘導(dǎo)組、表皮生長(zhǎng)因子誘導(dǎo)組次之，二組誘導(dǎo)率無顯著差異，單純以上清液誘導(dǎo)組效率最低。 結(jié)論:密度梯度離心結(jié)合貼壁篩選能獲得較純的骨