補(bǔ)體成分C3在腎小管上皮細(xì)胞表型轉(zhuǎn)化中的作用.pdf

1、目的：探討C3在腎小管上皮細(xì)胞表型轉(zhuǎn)化中的作用。 方法：(1)體外培養(yǎng)腎小管上皮細(xì)胞(HK-2)，將其分成對(duì)照組、50ng/ml IFN-γ組和50ng/ml TNF-α組。用RT-PCR法檢測(cè)HK-2細(xì)胞C3 mRNA的表達(dá)，Western Blot檢測(cè)C3蛋白質(zhì)的表達(dá)情況。(2) O.1μM C3a與HK-2細(xì)胞共培養(yǎng)24小時(shí)，用免疫熒光測(cè)定HK-2細(xì)胞α-SMA、E-cadherin的表達(dá)；(3)將HK-2細(xì)胞分成對(duì)照組、

2、C3a組、IFN-γ組和TNF-α組，RT-PCR法檢測(cè)α-SMA、E-cadherin mRNA的表達(dá)；Western Blot檢測(cè)α-SMA、E-cadherin蛋白的表達(dá)。 結(jié)果：(1)體外培養(yǎng)的腎小管上皮細(xì)胞可表達(dá)微量C3，分別加入50ng/ml IFN-γ和50ng/ml TNF-α后，腎小管上皮細(xì)胞C3 mRNA及蛋白質(zhì)的表達(dá)均明顯增加，與對(duì)照組比較有顯著差異(P<0.01)。(2)免疫熒光檢測(cè)顯示，正常腎小管上皮細(xì)

3、胞表達(dá)E-cadherin、而無(wú)α-SMA表達(dá)，經(jīng)O.1μM C3a刺激24小時(shí)，α-SMA表達(dá)顯著增加，E-cadherin表達(dá)明顯降低。(3).1μM C3a、50ng/ml IFN-γ和10ng/ml TNF-α與腎小管上皮細(xì)胞共培養(yǎng)24小時(shí)后，各組α-SMAmRNA表達(dá)均明顯增強(qiáng)，與對(duì)照組比較P<0.01，各組E-cadherinmRNA表達(dá)均顯著減少，與對(duì)照組比較差別有顯著意義，P<0.01； 結(jié)論：(1)體外培養(yǎng)的腎