RNA干擾對(duì)卵巢癌多藥耐藥細(xì)胞系SKOV3-TR30粘附性的影響.pdf

1、目的：探討MDR1-siRNA對(duì)人卵巢上皮細(xì)胞癌耐紫杉醇細(xì)胞株SKOV3-TR30黏附性的影響。
　　 方法：1.化學(xué)合成爭對(duì)MDR-1的基因?yàn)榘心繕?biāo)的siRNA，脂質(zhì)體法轉(zhuǎn)染SKOV3-TR30細(xì)胞。
　　 2.EDTA介導(dǎo)的細(xì)胞分離實(shí)驗(yàn)，檢驗(yàn)轉(zhuǎn)染前后細(xì)胞對(duì)塑料基底膜的粘附能力。
　　 3.MTT法檢測(cè)轉(zhuǎn)染前后細(xì)胞與基底膜及細(xì)胞外基質(zhì)成分LN和FN的粘附能力。
　　 4.Western Blot檢測(cè)轉(zhuǎn)染

2、前后細(xì)胞膜表面粘附蛋白CD44v6蛋白量表達(dá)的變化。
　　 5.免疫熒光觀察細(xì)胞膜表面CD44v6的變化。
　　 6.流式細(xì)胞計(jì)數(shù)對(duì)膜蛋白CD44v6的變化做定量比較。
　　 結(jié)果：1.EDTA介導(dǎo)的細(xì)胞分離實(shí)驗(yàn)表明，SKOV3-TR30/MDR細(xì)胞對(duì)塑料基質(zhì)的粘附能力明顯下降(P＜0.05)。
　　 2.對(duì)細(xì)胞外基質(zhì)和基底膜成分的粘附能力實(shí)驗(yàn)表明，SKOV3-TR30/MDR細(xì)胞對(duì)LN和FN的粘附能力均

3、較轉(zhuǎn)染前明顯下降(P＜0.05)。
　　 3.Western Bolt法及免疫熒光均觀察到轉(zhuǎn)染前后粘附分子CD44v6在細(xì)胞中的表達(dá)有明顯差異，SKOV3和SKOV3-TR30/MDR細(xì)胞中未見明顯表達(dá)，而SKOV3-TR30和SKOV3-TR30/non細(xì)胞中表達(dá)明顯，流式細(xì)胞計(jì)數(shù)顯示CD44v6陽性細(xì)胞百分率分別為30.72％、31.63％、66.09％和68.15％，SKOV3-TR30/MDR組明顯降低。