人工誘導(dǎo)扇貝雌核發(fā)育的研究.pdf

1、中國海洋大學(xué)博士學(xué)位論文人工誘導(dǎo)扇貝雌核發(fā)育的研究姓名：潘英申請學(xué)位級別：博士專業(yè)：水產(chǎn)養(yǎng)殖指導(dǎo)教師：李琪王如才20031201人工誘導(dǎo)扇貝雌核發(fā)育的研究常卵子與雌核發(fā)育卵子在受精和成熟分裂過程中的染色體行為變化。在2561uWCm“2s’1的強度下，紫外線(UV)照射精子30S可誘導(dǎo)出雌核發(fā)育單倍體。結(jié)果表明：櫛孔扇貝詐常精子和紫外線照射精子入卵后，精核都出現(xiàn)兩次明顯的膨大擴散過程。紫外線照射沒有明顯地影響精核向雄性原核的擴散轉(zhuǎn)化，但

2、使紫外線照射精核的直徑和膨脹速度明顯小于正常精核。盡管uV照射并沒有影響受精卵的成熟分裂以及雌性、雄性原核的形成，但使雌核發(fā)育卵的發(fā)育速度出現(xiàn)明顯的滯緩。在第1次卵裂中期，雌核發(fā)育卵子中的雄性原核沒有像雌性原核那樣形成染色體，而是濃縮為一染色質(zhì)小體(DCB)，游離在細(xì)胞質(zhì)中，不參與核分裂。胞質(zhì)分裂結(jié)束時，DCB位于2個卵裂球其中之一的細(xì)胞質(zhì)內(nèi)或在赤道板處被分割成兩部分。實驗結(jié)果首次提供了櫛孔扇貝雌核發(fā)育的細(xì)胞學(xué)證據(jù)。4極體抑制型雌核發(fā)育

3、二倍體的誘導(dǎo)：(1)利用6二甲基氨基嘌呤(60pg／ml；6DMAP)和細(xì)胞松弛素B(O5lag／mlCB)處理抑制第2極體，成功誘導(dǎo)出櫛孔扇貝雌核發(fā)育二倍體，誘導(dǎo)率分別為493％和524％。與CB處理相比，6DMAP誘導(dǎo)能孵化出較高比例的D形幼蟲。(2)細(xì)胞學(xué)觀察顯示，6DMAP抑制第二極體產(chǎn)生的雌核發(fā)育二倍體主要來源于第2次減數(shù)分裂后期的受精卵，由于阻止了染色體分離和原核移動。導(dǎo)致一個融臺的二倍性雌性原核的形成；而CB處理僅阻止了胞

4、質(zhì)分裂，導(dǎo)致兩個單倍性的雌性原核的形成；經(jīng)紫外線照射的精子核沒有受到6DMAP和CB處理的影響發(fā)育成雄性原核，但沒能形成染色體，沒有參與第一次卵裂后期的核分裂。實驗結(jié)果首次提供了櫛孔扇貝極體抑制型雌核發(fā)育二倍體的細(xì)胞學(xué)證據(jù)5第一卵裂抑制型雌核發(fā)育二倍體的誘導(dǎo)：(1)用6二甲基氨基嘌呤(60pg／ml；6DMAP)和細(xì)胞松弛素B(05g／ml；CB)抑制受精卵的第一次卵裂，在受精后60min和65min分別用CB和6DMAP處理20rai