西瓜離體雌核發(fā)育誘導(dǎo)單倍體與甜瓜SSR標(biāo)記圖譜構(gòu)建.pdf

1、葫蘆科包含西瓜、甜瓜、黃瓜和南瓜等重要的水果和蔬菜作物，是僅次于禾本科、豆科和茄科的第四大科。其經(jīng)濟(jì)價(jià)值巨大，但常規(guī)遺傳育種周期長(zhǎng)、費(fèi)時(shí)費(fèi)力、效率低。另外，葫蘆科作物基因資源缺乏，遺傳多態(tài)性相對(duì)較小，在一定程度上也制約了遺傳育種的發(fā)展。因此，在瓜類(lèi)作物中開(kāi)展單倍體與分子標(biāo)記輔助育種研究顯得尤為重要。為此，本研究展開(kāi)西瓜離體雌核發(fā)育誘導(dǎo)單倍體與甜瓜SSR標(biāo)記圖譜構(gòu)建研究，其結(jié)果如下：
　　 1.以西瓜雜交組合P1/P2為材料，展開(kāi)

2、未授粉胚珠離體培養(yǎng)研究。結(jié)果獲得了4個(gè)胚，其中一個(gè)沒(méi)有再生能力，其它3個(gè)胚R1、R2和R3誘導(dǎo)出再生植株。每個(gè)胚的再生植株隨機(jī)各取5株，利用流式細(xì)胞儀鑒定其倍性，利用3個(gè)在親本間具有多態(tài)性的SSR引物SSR58、SSR106和SSR125擴(kuò)增觀察帶型。結(jié)果R2胚的再生植株為單倍體，其SSR引物的擴(kuò)增帶型與親本之一的一致。R1和R3胚的再生植株可能為雙單倍體，有的SSR引物擴(kuò)增的帶型與親本之一的一致；有的SSR引物擴(kuò)增的帶型與F1的一致，

3、其原因可能是發(fā)生不等交換形成2n配子。
　　 2.利用甜瓜親本4G21×3A832的75株F2為群體，用165對(duì)在親本間有多態(tài)性的SSR標(biāo)記進(jìn)行作圖，對(duì)165對(duì)多態(tài)性SSR標(biāo)記進(jìn)行χ2檢測(cè)分析，發(fā)現(xiàn)有32個(gè)標(biāo)記位點(diǎn)表現(xiàn)為偏分離(p＜0.05)，占總標(biāo)記位點(diǎn)數(shù)的19.39％。在所有偏分離標(biāo)記中，23個(gè)標(biāo)記達(dá)到極顯著水平，占偏分離標(biāo)記的71.88％。在32個(gè)偏分離標(biāo)記位點(diǎn)中有8個(gè)標(biāo)記位點(diǎn)偏向母本4G21，占偏分離標(biāo)記位點(diǎn)數(shù)的25％，

4、18個(gè)標(biāo)記位點(diǎn)偏向父本3A832，占偏分離標(biāo)記位點(diǎn)數(shù)的56.25％，6個(gè)標(biāo)記位點(diǎn)偏向雜合體，占偏分離標(biāo)記位點(diǎn)數(shù)的18.75％。
　　 構(gòu)建了一張由17個(gè)連鎖群組成，包含144個(gè)SSR標(biāo)記的甜瓜分子遺傳圖譜。圖譜總圖距為970.236 cM，標(biāo)記間的平均距離為6.738 cM。17個(gè)連鎖群長(zhǎng)度17.949～111.826 cM，標(biāo)記位點(diǎn)數(shù)2～19個(gè)，平均標(biāo)記間距4.363～39.363 cM。標(biāo)記位點(diǎn)數(shù)最多的為L(zhǎng)G1連鎖群，包括1

5、9個(gè)SSR標(biāo)記；標(biāo)記位點(diǎn)數(shù)最少的為L(zhǎng)G2，LG14，LG17連鎖群，只有2個(gè)SSR標(biāo)記。平均標(biāo)記間距最大的連鎖群為L(zhǎng)G14，間距達(dá)39.363 cM。平均標(biāo)記間距最小的連鎖群為L(zhǎng)G1，間距為4.363 cM。兩個(gè)標(biāo)記間隔最大為39.363 cM，位于LG14連鎖群上的SSR543與SSR717。
　　 在32個(gè)偏分離的SSR標(biāo)記位點(diǎn)中，22個(gè)偏分離標(biāo)記定位于圖譜，分布于10個(gè)連鎖群上。偏分離標(biāo)記分別分布在LG1，LG3，LG5，

6、LG7，LG9，LG10，LG11，LG12，LG16和LG17連鎖群上，分別有4，3，1，5，1，3，1，2，1，1個(gè)SSR標(biāo)記，占偏分離標(biāo)記數(shù)的70.97％。另外有10個(gè)偏分離標(biāo)記未能定位到圖譜上。檢測(cè)到1個(gè)SDR，位于LG7連鎖群上。
　　 3.以4G21/3A832雜交組合的174個(gè)F2單株，P1、P2、F1為材料，分析了抗源4G21攜帶的蔓枯病抗性基因的遺傳規(guī)律，結(jié)果表明抗性由一對(duì)不完全顯性抗病基因控制。同時(shí)，對(duì)抗源4