灰樹(shù)花多糖結(jié)構(gòu)表征及其硫酸酯化多糖免疫活性研究.pdf

1、灰樹(shù)花是一種珍貴的藥食兩用真菌，營(yíng)養(yǎng)價(jià)值豐富?；覙?shù)花多糖作為一種生物大分子活性物質(zhì)，表現(xiàn)出良好的抗病毒、預(yù)防腫瘤及免疫調(diào)節(jié)等功能?；覙?shù)花子實(shí)體中水不溶多糖占據(jù)了灰樹(shù)花多糖的較大比例，硫酸酯化可使其具有良好的水溶性，增加并提高其生物活性，實(shí)現(xiàn)灰樹(shù)花多糖資源的充分利用。
　　本實(shí)驗(yàn)采用堿提酸沉法從灰樹(shù)花子實(shí)體中提取水不溶多糖，經(jīng)分離純化后得到白色灰樹(shù)花水不溶多糖組分GFP，測(cè)得其總糖平均含量為96.83％，含有少量的蛋白、糖醛酸，不含

2、硫酸基、核酸類物質(zhì)。綜合利用紫外光譜、紅外光譜、氣相色譜、氣質(zhì)聯(lián)用、核磁共振波譜等儀器分析技術(shù)，及酸水解、高碘酸氧化、Smith降解、甲基化等化學(xué)分析方法對(duì)GFP結(jié)構(gòu)進(jìn)行表征，表明GFP是由α-D-吡喃糖環(huán)構(gòu)成，其單糖組成為鼠李糖、木糖、甘露糖、葡萄糖，摩爾比為1.00∶1.04∶1.11∶6.21。葡萄糖(Glcp)殘基是GFP的主要結(jié)構(gòu)單元，占多糖的83％，推測(cè)GFP主鏈中每2個(gè)(1→3)-Glcp和1個(gè)(1→3，4)-Glcp間隔

3、相連，同時(shí)含有少量的1→、1→4、1→6連接的糖苷鍵。
　　硫酸酯化多糖的生物活性與多糖硫酸基的取代位置及取代度、多糖分子量及理化特性密切相關(guān)。采用三氧化硫三甲胺鹽-DMF法對(duì)GFP進(jìn)行硫酸酯化，制得水溶性硫酸酯化多糖S-GFP，總糖平均含量為60.04％,硫酸基取代度為1.42，且主要為C6位取代，并有部分雙取代存在，分子量為155 kDa。采用細(xì)胞染色、RT-PCR等技術(shù)研究S-GFP的免疫活性。結(jié)果表明，在一定濃度和時(shí)間范圍