野生黑木耳多糖的提取及性質研究.pdf

1、本學位論文在對野生黑木耳與栽培黑木耳的蛋白質、脂肪、總糖等營養(yǎng)成分及多糖含量進行了分析比較的基礎上，對野生黑木耳多糖的提取、純化、理化性質、單糖組分等進行了研究，并就野生黑木耳多糖對實驗性高脂血癥小鼠的降脂作用進行了實驗觀察。主要試驗結果如下： 1、野生黑木耳的蛋白質、脂肪、總糖、多糖含量分別比栽培黑木耳高0.70％、0.06％、1.40％、2.69％；野生黑木耳的水分、灰分和粗纖維含量分別比栽培黑木耳低0.26％、0.85％和

2、1.19％。經(jīng)SAS分析，蛋白質、脂肪、總糖和多糖含量差異不顯著，水分含量差異顯著，灰分含量和粗纖維含量都達到極顯著差異。野生黑木耳的維生素C、維生素B1和維生素B2含量分別比栽培黑木耳高6.8mg.(100g)-1、0.17mg.(100g)-1和0.052mg.(100g)-1。但野生黑木耳鐵、硒、鈣、鋅的含量分別比栽培黑木耳低0.13mg.g-1、0.005ug.g-1、118.59mg.kg-1、2.58mg.kg-1，經(jīng)SAS

3、分析，除鐵的含量差異不顯著外，其余都達到顯著差異。 2、采用熱水浸提、醇沉法提取野生黑木耳多糖，對野生黑木耳多糖提取工藝和一般理化性質進行了研究。選擇浸提固液比、溫度、時間和浸提次數(shù)作為單因素進行梯度實驗，確定其條件范圍，再通過正交實驗L9(34)進一步確定野生黑木耳水溶性多糖最佳提取工藝條件。結果表明最佳提取工藝為：固液比1：40、浸提溫度85℃、浸提時間2h、反復浸提2次。理化性質結果表明：提取的野生黑木耳多糖中含有多肽和A

4、A，為蛋白質復合多糖。 3、采用微波法輔助提取野生黑木耳多糖，改進了傳統(tǒng)的浸提工藝，通過單因素和正交實驗確定微波輔助提取的最佳工藝條件。結果表明：采用水作為提取劑、微波功率為560W、提取時間為35s、料液比為1：40、萃取時間為3h浸提效果最佳，多糖提取率達98.55％。與傳統(tǒng)的浸提法相比，時間由24h縮短為30s+3h，多糖產(chǎn)率為7.12％，微波輔助提取多糖具有時間短、耗能低、提取率高等優(yōu)點。 4、用兩種方法(氯仿-

5、正丁醇法和三氯乙酸-正丁醇法)脫除野生黑木耳粗多糖中的蛋白質，以脫蛋白率為指標，通過正交實驗L9(34)確定最佳脫蛋白分離工藝，對比兩種方法中最佳組合粗多糖得率的差異。結果表明：三氯乙酸-正丁醇法比氯仿-正丁醇法的脫蛋白效果好，最佳水平脫蛋白率為70.69％，但樣品中多糖損失較前者嚴重，多糖得率僅為67.87％；氯仿-正丁醇法最佳水平脫蛋白率為51.39％，多糖得率為80.31％。活性炭脫色正交試驗結果：活性炭添加量6％，脫色溫度為40

6、℃，脫色時間為20min。雙氧水脫色試驗結果：雙氧水濃度選用20％為好。兩種方法處理對脫色效果差異不顯著，對多糖得率有極顯著的差異。因此，選用雙氧水脫色效果較好。脫色脫蛋白后的多糖，經(jīng)透析法除去小分子雜質，經(jīng)醇沉淀、離心、冷凍干燥得純多糖。純多糖經(jīng)酸水解后制成多糖水解液，用紙色譜法進行單糖組分分析。結果表明：野生黑木耳多糖由半乳糖和木糖兩種單糖組成，Rf值分別是：0.36和0.44。 5、探討野生黑木耳多糖(WAAU)對小鼠誘導

7、型高脂血癥降脂作用的影響。選用雄性昆明小鼠70只，經(jīng)高脂飼料誘導成高脂血癥模型，按體重和血清總膽固醇水平均衡分為7組，其中6個實驗組分別經(jīng)胃灌注一定量的WAAU多糖，每天一次，連續(xù)30天，對照組用等劑量的蒸餾水代替，觀察WAAU多糖對小鼠體重，食量的影響及每周測定血漿脂質變化。結果表明：注射量在5％以上時小鼠的血清總膽固醇(TC)、血清甘油三脂(TG)顯著降低(p＜0.05)和血清高密度膽固醇(HDL-c)30后有顯著升高(p＜0.05