重慶市兒童α-和β-地中海貧血的分子流行病學(xué)研究.pdf

1、目的:α-和β-地中海貧血（簡(jiǎn)稱(chēng)地貧）是世界上最常見(jiàn)的常染色體隱性遺傳性疾病之一，是一組以α-或β-珠蛋白肽鏈合成減少或缺乏為特征的溶血性貧血，主要分布在全球瘧疾高發(fā)的熱帶和亞熱帶地區(qū)，在我國(guó)，多見(jiàn)于長(zhǎng)江以南的廣大地區(qū)。據(jù)世界衛(wèi)生組織估計(jì)，全球有近5億的人口攜帶有血紅蛋白變異基因，約占全球總?cè)藬?shù)的7％，其中約2.6億人是α-地貧基因攜帶者，有8000萬(wàn)-9000萬(wàn)人是β-地貧基因攜帶者。并且每年至少有30萬(wàn)的重型地貧患兒出生。重型地中海

2、貧血為致死性疾病，在高發(fā)區(qū)給社會(huì)和家庭帶來(lái)了沉重的負(fù)擔(dān)，同時(shí)也嚴(yán)重威脅了高發(fā)區(qū)的人口質(zhì)量。目前針對(duì)重型地貧的治療方法有限，早期世界發(fā)達(dá)地區(qū)的實(shí)踐和經(jīng)驗(yàn)已經(jīng)證實(shí):在地貧高發(fā)區(qū)通過(guò)早期篩查及遺傳咨詢(xún)預(yù)防重型地貧患兒出生是最有效的解決方案。通過(guò)人群的分子流行病學(xué)調(diào)查了解本地區(qū)地貧的流行情況，對(duì)于地貧的防治具有重大意義。本研究的主要目的旨在闡明α-地貧和β-地貧在重慶市的發(fā)生率、突變類(lèi)型及其頻率，為本地區(qū)開(kāi)展地貧預(yù)防計(jì)劃提供理論依據(jù)。
　

3、　方法:按整群隨機(jī)抽樣方法，在重慶市隨機(jī)抽取3個(gè)城區(qū)，與入托體檢指定的婦幼保健院合作，進(jìn)行連續(xù)隨機(jī)抽樣。共采集入托體檢兒童外周靜脈血標(biāo)本1754例，抽取外周靜脈血1.5-2mlEDTA抗凝進(jìn)行地貧篩查調(diào)查。對(duì)所選取的兒童進(jìn)行問(wèn)卷調(diào)查，包括性別、年齡、民族及籍貫等。采集的樣本進(jìn)行血常規(guī)和血紅蛋白電泳分析。β-地貧表型陽(yáng)性指標(biāo)為:MCV＜80 fl和（或）MCH＜27 pg，Hb A2＞3.3％和（或）Hb F＞2％。β-表型陽(yáng)性樣本首先進(jìn)

4、行中國(guó)人常見(jiàn)的18種β-地貧基因突變檢測(cè)，表型陽(yáng)性而未檢測(cè)出中國(guó)人已知突變基因型的標(biāo)本進(jìn)一步采用DNA測(cè)序法進(jìn)行β-珠蛋白基因分析。
　　從1754例標(biāo)本中隨機(jī)選取1057例進(jìn)行α-地貧的分子流行病學(xué)調(diào)查。所有樣本均進(jìn)行分子鑒定，采用采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR的方法檢測(cè)α-珠蛋白基因拷貝數(shù)異常，同時(shí)Gap-PCR法檢測(cè)α地貧五種缺失型（--SEA、-α3.7、-α4.2、--FIL、--THAI），采用多重PCR技術(shù)α-珠蛋白基因多倍

5、體進(jìn)行驗(yàn)證，DNA測(cè)序法檢測(cè)α地貧的突變型。
　　結(jié)果:本研究共選取重慶市入托體檢兒童1754例，其中檢出25例β-地貧雜合子，1例β-地貧雙重雜合子，人群中β-地貧的基因攜帶率為1.43％。25例β-地貧攜帶者中，共檢出7種突變類(lèi)型，最常見(jiàn)的4種依次是CD41-42(-CTTT)、IVS-Ⅱ-654(C→T)、CD17(AAG＞TAG)、βE(CD26，GAG＞AAG)，此四種突變型占全部突變基因的88.00％，是本地區(qū)的主要突

6、變種類(lèi)。此外，我們還發(fā)現(xiàn)5'UTR;+(43-40)(-AAAC)1種國(guó)內(nèi)少見(jiàn)突變類(lèi)型，并首次在中國(guó)人中發(fā)現(xiàn)異常血紅蛋白病Hb Zurich。
　　1057例兒童外周血標(biāo)本中共檢出α-地貧基因攜帶者55例，其等位基因55個(gè)，故α-地貧的基因攜帶率為5.20％。55例α-地貧基因攜帶者中，共檢出5種缺失型α-地貧，其中最常見(jiàn)的三種及構(gòu)成比依次為:-3.7缺失型（-α3.7)54.55％、東南亞缺失型（--SEA）18.18％和-4.

7、2缺失型（-α4.2）9.08％;檢出8種非缺失型α-地貧，包括一例Hb Quong Sze和7例α珠蛋白基因新突變。另外檢出α-三聯(lián)體(ααα)24例，人群基因攜帶率為2.55％。本研究中，我們還發(fā)現(xiàn)2例發(fā)生在α珠蛋白基因上的異常血紅蛋白病Hb J-Wenchang-Wuming和Hb Arya。經(jīng)文獻(xiàn)檢索證實(shí)，Hb Arya是首次在中國(guó)人種中發(fā)現(xiàn)并報(bào)道的。
　　結(jié)論:本研究闡明了重慶市α-和β-地貧的人群攜帶率和詳細(xì)的基因突變