腮腺炎病毒誘導小鼠睪丸天然免疫反應的機制.pdf

1、目的:腮腺炎病毒(mumps vims，MuV)感染常引發(fā)睪丸炎，導致男性不育。雖然疫苗的使用已有效地控制了腮腺炎病毒的大范圍流行，但近來臨床上腮腺炎病毒感染并發(fā)的睪丸炎有復發(fā)趨勢。認識MuV誘導睪丸天然免疫反應的機制，可為疾病防治提供線索。本文利用小鼠為模型，研究MuV誘導睪丸天然免疫反應的機制及其在睪丸細胞的復制與調(diào)控。
　　材料與方法:以C57BL/6或Toll樣受體(Toll-like receptor，TLR)基因敲除小

2、鼠（TLR2-/-，TLR3-/-和TLR4-/-）為模型，分離原代睪丸細胞。采用結晶紫染色感染的Vero細胞，測定病毒滴度。實時定量RT-PCR檢測基因表達水平，ELISA測定細胞因子的濃度水平，以及Western blot，免疫組織化學和免疫熒光的方法檢測蛋白的表達水平與細胞分布。并結合RNA干擾技術研究相關基因的功能。
　　結果:MuV可通過TLR2和RIG-Ⅰ信號通路誘導Sertoli及Leydig細胞產(chǎn)生天然免疫反應，產(chǎn)

3、生TNF-α、 IL-6、MCP-1、CXCL10及Ⅰ型干擾素(IFN-α和IFN-β)等細胞因子，而不能誘導生精細胞產(chǎn)生這些細胞因子。MuV感染后，Sertoli細胞產(chǎn)生的炎癥因子及趨化因子水平較Leydig細胞高，但IFN-α與IFN-β水平要低于Leydig細胞。體內(nèi)實驗證實，睪丸原位感染MuV可誘發(fā)睪丸局部天然免疫反應，并抑制Leydig細胞合成睪酮。
　　MuV能夠感染多種睪丸細胞，包括Sertoli、Leydig、巨噬

4、細胞和生精細胞，但MuV在不同細胞中的復制效率存在差異，這與細胞特異的抗病毒防御機制有關。MuV在Sertoli細胞中能快速復制并持續(xù)存在，在Leydig細胞和巨噬細胞中也有顯著性的復制，但在生精細胞中則檢測不到病毒的復制。Sertoli，Leydig，和巨噬細胞主要依靠產(chǎn)生Ⅰ型干擾素和抗病毒蛋白來抵御病毒感染，生精細胞則是依賴自身高水平的自噬來限制病毒的復制。
　　結論:MuV能夠誘導睪丸Sertoli及Leydig細胞產(chǎn)生天然