死亡受體4和5基因多態(tài)性與潰瘍性結(jié)腸炎的相關(guān)性研究.pdf

1、目的：炎癥性腸病(IBD)主要包括潰瘍性結(jié)腸炎(UC)和克羅恩病(CD)，近二十年來(lái)發(fā)病率呈逐年上升趨勢(shì)。盡管確切的病因和發(fā)病機(jī)制至今不明，但目前普遍認(rèn)為IBD是由環(huán)境、免疫及腸道菌群等多因素綜合作用于遺傳易感者所致的慢性非特異性腸道炎癥性疾病。其中腸上皮細(xì)胞和免疫細(xì)胞凋亡缺陷或調(diào)節(jié)失衡，可能是引發(fā)腸粘膜異常免疫應(yīng)答，最終導(dǎo)致腸組織炎癥反應(yīng)失控的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。腫瘤壞死因子(TNF)相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體(TRAIL)不僅是促細(xì)胞凋亡因子，還具有重

2、要的免疫調(diào)節(jié)功能。研究發(fā)現(xiàn)TRAIL能影響腫瘤及某些自身免疫性疾病的發(fā)生和進(jìn)展。TRAIL受體包括死亡受體(DR)4、DR5、誘騙受體(DcR)1、DcR2以及護(hù)骨素(OPG)。膜結(jié)合型TRAIL(mTRAIL)及血中可溶性TRAIL(sTRAIL)，與含有死亡結(jié)構(gòu)域的DR4和/或DR5結(jié)合后都能迅速誘導(dǎo)靶細(xì)胞凋亡，而對(duì)正常細(xì)胞幾乎無(wú)凋亡誘導(dǎo)作用。由于DcR1、DcR2和OPG缺乏功能性死亡結(jié)構(gòu)域，與TRAIL結(jié)合后不產(chǎn)生凋亡信號(hào)，但能

3、競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合TRAIL，從而削弱TRAIL誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡效應(yīng)。我們?cè)谇捌谘芯恐邪l(fā)現(xiàn)，TRAIL基因3'非翻譯端(G1525A/G1588A/C1595T)三種單核苷酸多態(tài)性(SNP)及血漿sTRAIL水平與UC的易感性相關(guān)。由于TRAIL的生物學(xué)功能與其受體緊密關(guān)聯(lián)，本研究擬在前期研究基礎(chǔ)上進(jìn)一步探討DR4和DR5基因多態(tài)性與UC易感性的相關(guān)性，旨在為揭示UC的遺傳免疫學(xué)機(jī)制提供依據(jù)。
　　方法：收集2004年1月至2012年9月溫

4、州醫(yī)科大學(xué)附屬第二、第一醫(yī)院，溫州市中心醫(yī)院消化內(nèi)科住院或門(mén)診確診的UC患者362例，對(duì)照組均來(lái)自溫州醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院體檢中心收集的性別、年齡相比配的健康體檢者，共490名。UC診斷標(biāo)準(zhǔn)根據(jù)中華醫(yī)學(xué)會(huì)消化病學(xué)分會(huì)2012年廣州會(huì)議制定的“炎癥性腸病診斷與治療的共識(shí)意見(jiàn)”。所有UC患者均經(jīng)臨床、實(shí)驗(yàn)室、影像學(xué)、電子結(jié)腸鏡、病理組織學(xué)等檢查綜合確立診斷并評(píng)估疾病嚴(yán)重程度。采用SNaPshot技術(shù)檢測(cè)DR4(rs20575，rs13278

5、062)及DR5(rs1047266)三個(gè)SNP位點(diǎn)的等位基因和基因型。采用x2檢驗(yàn)和Fisher精確概率分析UC組與對(duì)照組中3種SNP的分布差異，非條件 Logistic回歸分析三個(gè)SNP與UC臨床病理特征的關(guān)系，納入的變量包括性別、年齡、吸煙、病變部位和疾病嚴(yán)重程度，采用Haploview4.2軟件進(jìn)行連鎖不平衡檢驗(yàn)和單倍型分析。
　　結(jié)果：對(duì)照組中經(jīng)x2檢驗(yàn)發(fā)現(xiàn)DR4(rs20575，rs13278062)及DR5(rs10

6、47266)三個(gè)SNP位點(diǎn)的基因型分布均符合Hardy-Weinberg平衡定律(P=0.71，0.27，0.08)。與對(duì)照組相比，UC組中DR4(rs20575)突變等位基因(G)和基因型(CG+GG)的頻率均增高(3.18％比1.63％,P=0.035, OR=1.977,95％CI:1.037-3.769;6.08％比3.27％,P=0.049，OR=1.917，95％CI:0.992-3.705)。并且與輕中度UC患者相比，該位

7、點(diǎn)的突變等位基因(G)和基因型(CG+GG)的頻率在重度UC患者中明顯增高（8％比2.40％, P=0.008,OR=3.530,95％CI:1.456-8.560;16％比4.49％, P=0.004, OR=4.054,95％CI:1.605-10.243)。雖然DR4(rs13278062)的突變等位基因和基因型頻率在UC組與對(duì)照組之間均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P均＞0.05），但采用非條件Logistic回歸分析發(fā)現(xiàn)，重度UC患者中該位點(diǎn)

8、的突變等位基因(T)和基因型(GT+TT)的頻率均明顯低于輕中度UC患者（23％比36.06％，P=0.011，OR=0.530，95％CI:0.323-0.868;42％比61.22％，P=0.01，OR=0.459，95％CI:0.250-0.841）。此外，DR5(rs1047266)基因多態(tài)性在UC組和對(duì)照組之間均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P均＞0.05）。另外，采用Haploview4.2軟件對(duì)上述三個(gè)SNP位點(diǎn)進(jìn)行連鎖不平衡檢驗(yàn)，結(jié)果發(fā)