兩種導(dǎo)致中國人地中海貧血的新突變基因的鑒定.pdf

1、導(dǎo)致地貧的罕見突變基因的鑒定主要有2個來源.一是來源于臨床病人,二是來源于大人群地貧基因篩查.最近,在我們進行的廣東省5個中心城市α、β地貧流行病調(diào)查和四會市α、β地貧現(xiàn)場調(diào)查的基礎(chǔ)上,獲得若干具有α或β地貧臨床表型但采用針對中國人常見地貧類型的基因診斷未發(fā)現(xiàn)突變的樣本,我們對這些樣本進行了突變的鑒定和mRNA表達水平的研究.設(shè)計和方法采用整群抽樣的方法,對5605例臍血樣本和7792例婚檢樣本進行血液學(xué)表型分析結(jié)合中國人中常見的α、β

2、地貧基因篩查的流行病學(xué)調(diào)查基礎(chǔ)上,獲得血液學(xué)表型呈小細胞低色素,HbA2增高(β地貧)或降低(α地貧)而沒有已知地貧基因型改變的樣本,包括4例α地貧待確診樣本和5例β地貧待確診樣本.對于α地貧待確診樣本,采取α<,1>、α<,2>基因測序篩查未知的點突變,采用針對罕見缺失類型的gap-PCR、southern blot和跨斷裂點測序的方法篩查大片段缺失和確定精確的斷裂位點.對于β地貧待確診樣本,采用β珠蛋白基因全長測序的方法,篩查未知點

3、突變.通過上述方法鑒定的新的突變基因采用RT-PCR方法研究突變對珠蛋白基因功能的影響.結(jié)果和討論獲得了一種新的缺失11.1kb包括α<,1>、α<,2>基因在內(nèi)的α地貧基因和一種在中國人群中首次發(fā)現(xiàn)的位于β珠蛋白基因啟動子區(qū)-90位的C→T突變基因,并在GeneBank注冊,注冊號分別為:AY342392、AY260740.RT-PCR顯示攜帶缺失11.1kb的α突變基因的患者其α基因mRNA表達水平與基因型為--SEA/αα患者相當(dāng)